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* * 课题3 分解纤维素的微生物的分离 课题背景 纤维素,地球上含量最丰富的多糖类物质,40%--70%能被产生纤维素酶的微生物分解利用。认识此类微生物,对于人们充分利用秸秆等废弃物生产所需,在非常重要的意义。 基础知识 (一)纤维素与纤维素酶 成熟的棉株 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连的高分子化合物。棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 纤维素 纤维素酶(复合酶) 纤维素酶水解滤纸实验 C1酶 CX酶 葡萄糖苷酶 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 实验: 操作 现象 解析 (二)纤维素分解菌的筛选 四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈 刚果红染色法 刚果红+纤维素 红色复合物 实验设计 [资料一] 土壤取样 由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10 cm左右腐殖土壤中。 [资料二] 选择培养 培养基的配制原则 目的明确 营养协调 PH适宜 根据微生物种类、培养目的选择培养基 细菌(6.5---7.5) 放线菌(7.5---8.5)酵母菌、霉菌(4—5.8) 培养基的种类 固体:微生物分离、记数 半固体:观察运动、趋化性研究、菌种鉴定、 厌氧菌培养 液体:工业生产 根据物理性质 水碳源氮源P、SK、Mg生长因子 根据用途 选择培养基 选择培养基:加入某种化学物质,抑制不需要的微生物,促进需要的微生物生长 加纤维素---选择纤维素分解菌 鉴别培养基 鉴别培养基:培养基中加入某种指示剂或化学药品,鉴别不同种类的微生物 刚果红----纤维素分解菌(红色) [资料三] 刚果红染色法 方法一 方法二 结果分析与评价 1.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出 ( ) A.大肠杆菌 B.霉菌 C.放线菌 D.固氮细菌 反馈练习 D *
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