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检测生物组织中的 糖类、脂肪和蛋白质 实验原理 可溶性还原糖+斐林试剂?砖红色沉淀——醛基 脂肪+苏丹Ⅲ/Ⅳ?橘黄色/红色 蛋白质+双缩脲试剂?紫色反应——肽键 目的要求:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 实验仪器:双面刀片,试管(最好用刻度试管),试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三角架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜 还原糖的检测和观察 实验材料:苹果或梨匀浆 说明:进行可溶性还原糖的鉴定为含有较多的糖且近于白色的植物组织 知识储备: 不属于还原糖——淀粉、纤维素、蔗糖 实验试剂: 斐林试剂(甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液, 乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液) 实验步骤 向试管内注入2mL待测组织样液 向试管内注入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入) 将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热2min(水浴加热) 观察试管中出现的颜色变化 实验结果:试管中出现砖红色沉淀 脂肪的检测和观察 实验材料:花生种子,花生种子匀浆 说明:花生种子含脂肪多且肥厚,是用于脂肪鉴定的理想材料 实验试剂:苏丹Ⅲ/Ⅳ染液 方法一:向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察样液被染色的情况 实验结果:样液被染成橘黄色 方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况 实验步骤:取材→切片→制片→观察 取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮 切片:用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用 制片:从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央;在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液,染色3min(如果用苏丹Ⅳ染液,染色1min);用吸水纸吸去染液,再滴加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,吸去浮色;用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片 观察:在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清楚;换高倍显微镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见——实验结果 注意: 脂肪的鉴定不一定要用显微镜 要观察脂肪颗粒,则必须用显微镜 蛋白质的检测和观察 实验材料:豆浆,鸡蛋清 说明:大豆种子蛋白质含量高,是进行蛋白质鉴定的理想的植物组织材料。鸡蛋清蛋白质多,也是进行蛋白质鉴定的动物材料 实验试剂:双缩脲试剂(A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液; B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液) 实验步骤 向试管内注入2mL待测组织样液 向试管内注入双缩脲试剂A液1mL(NaOH),——创造碱性条件 向试管内注入双缩脲试剂B液(Cu(SO4))4滴,摇匀 观察试管中出现的颜色变化 实验结果:试管中呈现紫色变化 注意:要先滴加NaOH溶液,创设碱性条件 注意:如果实验材料用鸡蛋清,要记得稀释! 淀粉的检测和观察 实验材料:马铃薯匀浆 实验试剂:碘液 实验步骤 向试管内注入2mL待测组织样液 向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化 实验结果:试管中呈现蓝色变化 例题检测 将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定粘留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆分别用的试剂是( )? A.碘液、苏丹Ⅲ溶液 B.双缩脲试剂、碘液 C.亚甲基蓝溶液、苏丹Ⅲ D.碘液、斐林试剂 2、鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,不需用的化学试剂是( ) A.斐林试剂 B.苏丹Ⅳ染液 C.双缩脲试剂 D.红墨水 某同学在鉴定生物组织中脂肪时,其实验方法、步骤、结果、记录如下:将花生浸泡并用豆浆机研磨出某组织样液,取该样液2mL滴入试管,向试管中加入2mL斐林试剂,振荡均匀,此时溶液呈蓝色。向试管中滴入双缩脲试剂A、B混合液2mL,振荡均匀将这支试管放入盛开水的烧杯中,用酒精灯加热煮沸,观察到有砖红色沉淀产生。 (1)如何纠正实验方法及结果的错误? (2)若用此样液鉴定可溶性还原糖,应改正的方法、步骤是什么? 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 例题检测 (4)向样液中加入2 mL.双缩脲试剂A,摇匀,观察颜色变化,再加入3—4滴双缩脲试剂B,摇匀,产生紫色反应 * 方法一后最好直接加实验结果 !第一个用到酒精的实验 最好一 最好一题一答案 视频 葡萄糖,果糖,麦芽糖 1.不需打成样液,只需先做徒手切片,制成临时装 片,用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色,用显微镜观察 2.用显微镜观察,先用低倍镜,后用高倍镜,观察到橘黄色小圆颗粒即为染色的脂肪颗粒 向样液试管中加入斐林试剂甲液和乙液的均匀混合液,观察颜色,再放入水浴中加热煮沸2min,有橘红色沉淀产生 向样液中加入2 mL双缩脲试剂A,摇匀,观察颜色变化,再加入3—4滴双缩脲试剂
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