将植物组织培养流程.docVIP

附录一 植物组织培养流程及相应图片 配制培养基并进行高温蒸汽灭菌20min； 接种工具以及超净工作台灭菌：接种工具用高温蒸汽灭菌，超净工作台用紫外灯灭菌30min； 外植体消毒：首先用流水冲洗外植体，用酒精灭菌30s，再用0.1%升汞消毒10min，最后用无菌蒸馏水冲洗4-5次； 用75%酒精对手进行灭菌消毒； 接种：用剪刀剪取1cm2左右的叶片或者1cm长的茎段，迅速放入三角瓶中，并立即封口； 将接种的三角瓶放入组培室中进行培养，大约2周后（时间根据培养条件不同而不同）长出愈伤组织，如图1、2； 图1 西瓜茎段愈伤组织 图2 烟草叶片愈伤组织 长出愈伤组织后，即可进行继代和分化培养，具体流程与接种一致，只是将外植体换成愈伤组织，并注意无菌条件的控制，如图3、4； 图3 西瓜愈伤分化 图4烟草愈伤分化 将继代分化的愈伤组织放入适宜的条件下进行光照培养，诱导出芽和根，如图5、6 图5 西瓜诱导发芽 图6西瓜诱导发芽生根 将诱导出根和芽的植株进行练苗； 练苗后的植株移栽到自然条件下，让其自然生长繁殖，最终达到植物组织培养的目的。