几种微生物表达系统比较.pdfVIP

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安徽农学通报,Anhui 几种微生物表达系统的比较 陈 明 陈文静 (福建师范大学生命科学学院.福建福州350108) 摘要:微生物表达系统是用于蛋白质生产及性质研究的重要基础。常用的微生物表达系统有大肠杆菌表达系统, 酵母表达系统和丝状真菌表达系统。该文主要介绍了上述表达系统的优缺点,并作比较分析。 关键词:表达系统;大肠杆茵;酵母;丝状真菌 中图分类号Q939.121文献标识码A 文章编号1007—773112011)03—68—04 ofSomeMicrobial Comparisons ExpressionSystems Chen eta1. Ming Normal ofLife (Fujian University,CollegeSciences,Fuzhou350108,China) microbial is for includeE.CO- Abstract:The thefoundation and expressionsystem proteinproductioncharacterization,which li andfilamentous this are todoa expressionsystem,yeastexpressionsystem hngi paper,welikely expressionsystem.In briefintroductionofthree above. expressionsystems Keywords:Expressionsystem;E.coli;Yeast;Filamentousfungi 随着现代生物技术的发展,利用各种表达系统进行外 大肠杆菌表达真核蛋白的基因,一般只能以cDNA的形式 源基因表达成为商业蛋白生产的重要手段。微生物表达 克隆至载体,而且设计时应从活性蛋白编码序列开始,甚 系统具有培养简单,周期性短,成本低等优点,是商业性蛋 至可以在真核基因cDNA上游添加原核信号肽序列进行 白重要的表达来源。常用的微生物表达系统主要有大肠 分泌表达H1。(3)真核基因的mRNA与原核基因在结构 杆菌表达系统,酵母表达系统以及丝状真菌表达系统。 上存在差异。真核基因mRNA的3’端存在poly(A)尾巴, l大肠杆菌表达系统 5’端具有帽子结构,而且真核mRNA没有SD序列,这些 在多种表达系统中,大肠杆菌表达系统是目前研究最 降低了真核基因mRNA在大肠杆菌中的稳定性,不利于同 为深入,发展最迅速的原核表达系统。作为生命科学研究 核糖体的结合。真核基因的启动子无法被原核细胞的 的模式生物之一,大肠杆菌不仅在遗传学背景,基因表达 RNA聚合酶识别。现在常常把真核基因插入至原核启动 调控机理方面的研究已经非常清晰,而且拥有多种适应不 子下游来解决这个问题。(4)真核生物与原核生物密码 同表达的载体和宿主菌。大肠杆菌可以表达多种多肽和 子偏好性不同,若外源基因存在较多大肠杆菌的稀有密码 蛋白质,具有生长繁殖快,培养简单,低成本,表达量高的 子,基因转录步骤将不能有效进行,最后影响该基因在大 特点,目前已成为实验室首选的外源表达系统。原核蛋白 肠杆菌系统中的高效表达。(5)蛋白在大肠杆菌内多数 在大肠杆菌体内表达,可以得到天然构象;外源真核蛋白 为非分泌型表达,细胞内杂蛋白多。制备目的蛋白,不仅 如果具有以下性质:分子量小于70

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