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农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (2): 295~300
·研究论文 ·
三系杂交水稻真伪及纯度实时 PCR 技术 的鉴定 *
1,2 1 1 3 4 5 6
程 毅 朱水芳 陈红运 杨和华 张万霞 黄世文 朱金 国
, **, , , , ,
中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所 ， 北京 ； 湖南农业大学生物安全科技学院 ， 长沙 ；
(1. 100029 2. 410128
国家杂交水稻工程技术研究中心 ， 长沙 ； 中国农业科学院作物品种资源研究所 ， 北京 ；
3. 410128 4. 100081
中国水稻研究所 ， 杭州 ； 湖南出入境检验检疫局 ， 长沙
5. 310006 6. 410007)
摘要：如何 建立一套快速、 准确 的杂交水稻真伪及纯度检测体系一直是困扰着口岸检疫人员 的难题 。实时荧光 PCR技术
是近年来新兴的检验技术。通过对已报道的雄性不育特异片段 进行 PCR 验证， 发现其可作为鉴定杂交稻不育胞质
的分子标记。依据此片段设计并合成 对引物和 条 荧光探针， 对 个水稻 品种进行实时荧光 检
1 1 TaqMan 17 ( ) PCR
测并对反应体系进行优化。结果表明 ： 此探针能特异扩增三系杂交稻 F1 及不育系， 并可准确地鉴定单粒稻种 ， 准确率为 100%。
探针在测定低浓度 （ ） 样品时偏差在 左右 ， 在测定高浓度 （ ） 样品时 ， 偏差在 左右 ， 能初步用于三系杂
10%~40% 2% 50%~100% 5%
交稻的纯度检测。反应体系 的最佳复性 延伸温度为 ； 最佳 2+ 浓度为 ， 由此建立了一套准确 、 快速的三系杂
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