淋病奈瑟菌porB-1tB核酸疫苗构建及其免疫活性初步研究.pdfVIP

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2017-08-30 发布于安徽
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淋病奈瑟菌porB-1tB核酸疫苗构建及其免疫活性初步研究.pdf

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淋病奈瑟菌porB．1tB核酸疫苗的构建及其免疫活性的初步研究硕士研究生：陈敏导师：胡四海教授中文摘要析核酸疫苗的免疫活性，为研制淋病核酸疫苗提供实验依据。 E．coli BL21中，0．8mmol／LIPTG诱导带6-His的融合重组蛋白的表达，用带6-His组氨水平。末次免疫后2W取小鼠脾细胞于37C5％C02培养箱中培养后，MTT法检测淋巴的表达。． 3 织化学法检测到重组蛋白能在小鼠鼻粘膜组织内表达。小鼠的生殖道冲洗液中能检测到增殖程度无明显升高(乃O．05) 【结论】 BL21中表达出相应的重组融合蛋白，制 +pET30a原核表达载体，目的基因均在E．coli ’ 备出高纯度的具有较强免疫原性和抗原性的融合蛋白。细胞中获得表达。导小鼠产生特异性体液免疫反应，尤其是黏膜免疫应答。性sIgA水平。【关键词】淋病奈瑟菌；PorB蛋白；粘膜佐剂LTB：融合蛋白：核酸疫苗基金项目：国家自然科学基金(No 4 ^ ·‘ n ’‘ ●1 ● …一一一 - 一 0I ConstructionnncleicaCldVacclnewithNeisseria BfusedwithBsubunitofEscherichiacoli porinprotein enterotoxinandstudiesits heat-labile on ABSTRACT ective： Obj Toconstructtherecombination prokaryoticexpression and vectorsintoE．coli．BL21Cacl2to pET30a／ltB—porB)，transformexpression by express recombinantfusion and their constructtherecombination proteinsanalyzeantigenieity．To eukaryoticexpression immunizemice for andevaluatethe BALB／cintranasallyproducingPorB-specialantibody effect． immulonogic Methods： The andltB were fromNeisseria Estrainor porB gene gene amplified gonorrhoeae EscherichiacoilH44815strain andltB werefused、枷th respectively．TheporBgene gene a linker PCR．ThePCR