NO-1886对胰岛素抵抗HepG2细胞糖原代谢影响及其机制研究.pdfVIP

NO．1886对胰岛素抵抗HepG2细胞糖原代谢的影响 及其机制研究 研究生：魏寒松 导师：王宗保教授 专业： 生物化学与分子生物学 摘要 背景和目的：血浆游离脂肪酸浓度增高是引起胰岛素抵抗和2型糖尿病的重要 危险因素。但是游离脂肪酸诱导胰岛素抵抗的机制目前尚不明确。有研究显示， 游离脂肪酸抑制胰岛素刺激的骨骼肌葡萄糖转运和肝脏糖原合成可能是由于胰 岛素信号损伤所致。此外，脂蛋白脂酶异常与血脂代谢紊乱、肥胖和胰岛素抵抗 的发生关系密切。 实验证明，NO．1886(二乙基苯基磷酸脂衍生物)具有很强的活化脂蛋白脂 酶的作用。它能够提高动物脂肪、心肌和骨骼肌组织中LPLmRNA的表达和LPL 活性，升高肝素后血浆LPL活性和数量，降低血糖、血浆三酰甘油，升高高密度 脂蛋白胆固醇水平；促进脂质氧化，抑制脂质蓄积，减轻胰岛素抵抗。本研究通 在P13．K／AkVGSK．3信号通路调节肝糖原代谢中的重要作用。 方法：体外培养，利用高浓度棕榈酸诱导建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型。用 葡萄糖氧化酶法检测细胞培养上清液中葡萄糖消耗量：用高碘．希夫氏染色和葸 酮比色法检测细胞内糖原含量；用酶比色法检测细胞培养上清液中游离脂肪酸的 含量。用荧光定量逆转录．聚合酶链式反应检测细胞内Aktl、Akt2、GSK．30r、 blotting 结果：用棕榈酸诱导HepG2细胞胰岛素抵抗结果显示，0．5mmol／L的棕榈酸处 理HepG2细胞48hs后，细胞上清液中葡萄糖消耗量显著降低，游离脂肪酸含量 能够增加上清液中的葡萄糖消耗量和细胞内糖原含量；降低上清液中游离脂肪酸 结论：脂蛋白脂酶活化剂NO．1 886 886能够增加HepG2细胞糖原合成。NO．1 增加细胞内糖原合成可能与调节P13．K／Akt／GSK．3信号通路有关。 关键词： NO．1886，游离脂肪酸，胰岛素抵抗，糖原合酶激酶．3，糖原代谢。 4 RoleandMechanismofNO一1886in in Metabolism Glycogen Cellswithinsulinresistant HepG2 Abstract and free Aim：The of acidWasthe risk Background increasingfatty important factorofinsulinresistanceand 2diabetes．ThemechanismsthatFFAinduced type insulinresistancewere recentevidence thatthis effect unclear,but suggestedlipotoxic ofFFAsdecreasedskeletalmuscle stimulated glucosetransport byinsulin,liver Was that