Caveolin-1提高白藜芦醇抗肿瘤活性及入胞转运机制研究.pdf

中文摘要 Caveolin．1提高白藜芦醇抗肿瘤活性及入胞转运机制研究 研究生：陈卫琼 导师：杨慧龄教授 专业：药理学 机制。 分别转染HepG2细胞并通过相应的生物素抗性标记筛选建立稳定细胞株；建立人 肝胚细胞癌裸鼠移植瘤治疗模型，观察白藜芦醇协同Caveolin．1体内抗肝癌作用； 采用高效液相色谱仪检测动物实验获取的裸鼠瘤结节、眼球血、肝脏、肺脏、以 及肌肉组织标本中白藜芦醇的浓度：化学合成白藜芦醇的衍生物荧光探针展示白 理细胞前后拓扑异构酶II 瘤结节组织中VEGF、拓扑异构酶II Caveolin．1对移植瘤新生血管形成的影响。 结果：人肝胚细胞癌裸鼠异种移植瘤模型治疗实验结果显示：与Hep02对照组 以及RNA干扰组却能促进HepG2裸鼠移植瘤的生长；白藜芦醇处理后各组移植 CA、，1 检测显示：瘤结节组织中，HepG2对照组中RES含量的相对值为1．17， 球血、肝脏、肺脏、以及肌肉组织标本中，各组别的RES含量相对值没有明显差 异。化学合成l也S的衍生物丹磺酰白藜芦醇，结合间接免疫荧光技术检测胞内 RES与Caveolin．1的分布及定位情况。实验发现： 与丹磺酰白藜芦醇两者分布区域相同，存在完全共定位模式；在CAVM2组中， 则失去了与丹磺酰白藜芦醇共定位模式。免疫荧光法及免疫组化双染检测结果显 示：加药组拓扑异构酶II 述蛋白表达水平最低，加药处理后，拓扑异构酶110【的表达水平上调，部分细胞 恢复拓扑异构酶IIa的表达。免疫组化SP检测结果也证实：白藜芦醇能够协同 Caveolin．1抑制人肝胚细胞癌裸鼠移植瘤细胞VEGF蛋白的表达。 结论： 1． 白藜芦醇能有效抑制人肝胚细胞癌HepG2裸鼠移植瘤的生长，具有较强的体 内抗肿瘤活性。 2．过表达Caveolin-1能够增强白藜芦醇抑制肿瘤生长的作用。 合域能提高白藜芦醇在肿瘤细胞内的蓄积相关。 关键词：白藜芦醇；Caveolin．1；HepG2细胞；移植瘤：抑制作用 2 ABSTRACT Caveolin．．1enhancesresveratr01．mediatedantitumoreffectand ina carcinomamodel transporthepatocellular theinhibitioneffectofResveratrolcombinedwithCaveolin-1 objective：Tostudy onhuman lineinvitro in carcinomacell and hepatocellularHepG2 vivo，and themechanismofactionofcaveolin-lmutantson investigate resveratrol endocytosis． Methods：Plasmids (CAVlabsence81-101aminoacids gene gene absence143—156 acidsas controland amino lipid-bindin