GW5074对imDC诱导初始性CD4-%27%2b-T细胞分化为Treg细胞作用体外研究.pdfVIP

GW5074对imDC诱导初始性CD4+T细胞分化为 Treg细胞作用的体外研究 中文摘要 作用，探讨未成熟DC诱导免疫耐受的可能分子机制，为建立器官移植免疫耐受提 供理论依据。 ． ． 方法取一名健康成人肘静脉血50ml，密度梯度离心法从血液标本中分离 联合诱导、扩增至第7天，使其转化为imDC，从细胞形态学、细胞表面标记物以 及细胞功能三方面进行鉴定。同法取一新生胎儿脐静脉血50ml，从中分离单个核 细胞，免疫磁珠分选法从单个核细胞中分离初始性CD4+T细胞，将其均分为5组细 胞培养，并分别作以下处理：(1)空白对照组：脐静脉血初始性CD4+T细胞单独培 养，细胞培养液中不加imDC，也不加GW5074稀释液；(2)阳性对照组：imDC与 比混合培养，细胞培养液中同时加入终浓度为8u 胞培养液中同时加入终浓度为24u u 加入终浓度为40 CD4+T细胞转化为Treg细胞的转化率。 结果 (1)倒置相差显微镜鉴定imDC：在形态学方面，培养至第7天的单个 核细胞悬浮生长，表面可见毛刺状突起，体积较前增大。(2)扫描电镜观察imDC： 培养7d的DC，扫描电镜下可见细胞形态呈不规则形，有许多大小不一的树状突起。 1，中浓度 GW5074组l 比较均有显著性差异，P值0．01。 结论 高效的imDC的体外培养方法。 (2)人外周血来源的imDC可以诱导初始性CD4+T细胞转化成Treg细胞。 通过该信号转导通路得以实现的。 关键词 imDC；Treg细胞；ERKl／2；GW5074；免疫耐受 2 EffectsofGW5074intheProcessofimDCs theNaive Inducing CD4+TCellstoDifferentiateinto CellsinVitro Treg ABSTRACT the inhibitorof kinaseRaf-1to GW5074，as Object：Through special protein inhibitERKI／2 effectofthis Was inthe signal signalpathwayinvestigated pathway,the ofimDCson thenaive CD4+Tcellstodifferentiateinto process inducing allogeneic Treg cellsinvitroinorderto the molecularmechanismsabout explorepossible immune． toleranceand theoreticalevidencestocreateimmunetolerancein provide organ transplantation． Methods：50mlelbowveinbloodin