EGCG降低人肺癌A549%2fDDP细胞多药耐药性和机制初步研究.pdfVIP

EGCG降低人肺癌A549／DDP细胞的多药耐药性和机制的 初步研究 硕士研究生：萧赦 导 师：罗招阳教授 中文摘要 目的：探讨EGCG对肺癌耐药细胞株A549／DDP耐药性的逆转作用及机 制。 A549／DDP细胞药物敏感性的影响；ICP．MS法检测细胞内顺铂浓度的变化； AO／EB染色法检测EGCG联合顺铂处理A549／DDP细胞前后凋亡的形态学改变； 流式细胞术检测凋亡率；RT-PCR方法观察EGCG作用前后耐药基因GST-n、 MRP2mRNA表达的变化；WesternBlot方法观察EGCG作用前后耐药蛋白 GST-n、MRP2、Survivin表达的变化。 EGCG均可增加细胞对顺铂的敏 抑制率低于10％；20pg／ml、40pg／ml、60pg／ml 感性；ICP．MS法检测细胞内顺铂浓度随着EGCG浓度的增大逐渐增高；荧光显 微镜下观察到EGCG处理后细胞体积缩小，核固缩，呈典型的凋亡形态学改变； EGCG联合顺铂处理细胞24小时 流式细胞术显示，2099／ml、401xg／ml、6099／ml 后，凋亡率逐渐增加，说明EGCG联合顺铂能够促进肺癌耐药细胞株A549／DDP MRP2、Survivin蛋白表达均下调。 结论：EGCG能够部分逆转A549／DDP细胞对顺铂的耐药性，其机制可能 表达诱导凋亡有关。 关键词：EGCG；肺癌；化疗敏感性；细胞凋亡；顺铂 Researchonreversaleffectof resistanceinhuman multidrug its adenocarcinomacellsA549／DDPEGCGand Lung by mechanisms Abstract thereversaleffectof objective：Toinvestigate resistanthumanadenocarcinomacelllineA549／DDPandits multidrug lung drug mecharisms． possible ofEGCGand to inA549／DDPcell Methods：Cytotoxicitysensibilitycisplatin line，a DDP—resistancecelllineofhuman studiedMTT adenocarcinoma,were lung by assay． of Wasdetected Theintracellularconcentration by cisplatin inductivelycoupled mass methodWasusedto the plasma spectrometry(ICP—MS)．AO／EBdisplay ofA549／DDPc