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验证重组质粒的方法改进.pdf
验证重组质粒的方法改进
江苏大学 毛浪勇
背景:通常实验室中挑斑进行菌液 PCR 验证重组质粒时是将单菌落挑到含培养基的试管中培养七
八个小时后,再用菌液作为模板进行菌液 PCR 验证。这样挑一个单菌落就需要用一支试管,而且还需
要等至少七八个小时才可以进行菌液 PCR 验证,这不仅浪费时间也浪费了大量的实验材料。
方法改进:挑斑时可以多用一个含筛选标记的平板,在平板的底部用记号笔将其分为小方格,并依
次编号。挑斑之前配好 PCR 的反应液,并分装在 PCR 管中,然后用牙签挑单菌落在 PCR 反应液中稍
微蘸一下,接着用该牙签在新的平板中的一个小方格中扎一下。挑斑结束后就可以进行 PCR 验证,同
时新的平板也可以放在培养箱中进行培养。
结果:用该方法无论挑多少个单菌落都可以非常方便快速的完成,过程中不仅节省了培养细菌的时
间,也不再需要用到大量试管和培养基,节省宝贵的时间和实验材料。
2010年10月27日实验室创新技术精选(上) 第 12 页,共 20 页 下一页 返回
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