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适配体与氧化石墨烯相互作用的原理及应用 李爽 (辽宁师范大学，辽宁 大连 116000) 摘要：适配体是一段由25—80个碱基构成的单链寡核苷酸片段，能够作为分子识别物质与蛋白、抗原、氨基酸等目标分子高亲 和力和高特异性结合，具有很好的选择性，已广泛应用在生物传感领域。氧化石墨烯具有独特的光学、表面特性，因此在生物分析等 领域具有较好的应用前景。在研究中成功发现氧化石墨烯能够猝灭荧光素的荧光，而加入DNA适配使得猝灭后的荧光强度得以部 分恢复。基于此种现象，研究氧化石墨烯、DNA适配体、荧光素三者之间的相互作用，优化实验的条件，建立基于氧化石墨烯的免标记 荧光定量检测DNA适配体的手段，有着比较好的效果。本论文为更深层次研究荧光适配体传感器提供了快捷简单的DNA适配体检 测方法． 关键词：适配体；DNA；氧化石墨烯；荧光 中图分类号：Q503文献标识码：A文章编号：1003—5168(2014)12一0196一03 1前言 烯的FRET传感器中，氧化石墨烯既能够作为供体，又能够作为 适配体(aptamer)是一段单链寡核苷酸片段，由25—80个碱 受体。一方面，氧化石墨烯由于其自身性质，是常用的猝灭剂；另 基组成，它可以是RNA，DNA或者双链DNA。与其它分子识别物一方面，经过相应的化学处理，可以成为荧光供体。而两者之问 质相比，适配体作为传感器的分子识别物质具有以下几方面优 氧化石墨烯材料更常作为猝灭剂(图1)。 点：(1)高亲和力、高特异性：适体与配体问的亲合力经常大于抗 原抗体之问的亲合力，从而具有较好的选择性。(2)目标分子范 +瀚一豁赫， 围广：与抗体、酶、单链DNA不同，适体不但可以和酶、抗体等较 大的蛋白质分子结合，而且可以和氨基酸、核苷、肽等小分子结 辫～ 合，甚至可以和完整的病毒颗粒、细菌以及细胞结合。(3)体外筛 图 1G0猝灭荧光物质的作用机理 选、化学合成：适体不依赖于动物或细胞制备，它可以由SELEx 依托于一些生物分子构建的桥联基，通过调节氧化石墨烯 技术体外筛选产生，通过化学方法生产筛选出的适体具有纯度 FRET生物传感器供体荧光团和受体之问的距离，可以引起荧光 高、组成确定、批问误差小、单抗制备相比更廉价和更快速的优 的变化。氧化石墨烯具有较强静电引力、盯一盯堆积等作用，能够 点。这有利于生物传感器的大量生产。(4)分子量小：适体由25— 将其应用于生物分子的固定化中。Chang等【2]研发了一种适配 80个碱基组成，分子量小，与目标分子结合的空问位阻也小。这 体一G0荧光传感器，通过适配体与凝血酶的特异反应来检测凝 就有利于构建高密度阵列生物传感器。(5)稳定性好、具有可复 血酶的含量。 性：与酶和抗体相比，适体不但具有良好的稳定性，而且能够进 然而上述方法有成本高、操作复杂的缺点。本实验中，利用 行重复利用。这有利于延长生物传感器的使用寿命。 氧化石墨烯与DNA适配体之问具有盯一盯堆积等非共价结合的 oxide，G0)是化学修饰石墨烯中一种 氧化石墨烯(gmphene 特性和氧化石墨烯FRET猝灭荧光物质p]的原理，研究氧化石墨 高度氧化的形式，表面含有一C00H等许多含氧官能团，它具有