幽门螺杆菌作用后AGS细胞内钙离子的动态变化研究.pdfVIP

现代消化及介入诊疗 2010年 第 15卷 第 1期 ModemDigestionIntervention2010，Vo1．15，No．1 — 1 · 论 著 · 幽门螺杆菌作用后AGS细胞内钙离子的动 态变化研究 肖 迪 陶晓霞 孟凡亮 王海滨 乔 博 何利华 李培京 张建中 摘【要】背景 幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)感染与胃癌发生密切相关，但致病机制尚未清晰。 细胞毒素相关蛋白A(CagA)是 I型 的主要毒力因子，在 诱导的疾病特别是 胃癌的发展中起重要 作用。前期的研究发现，却 作用后人胃腺癌上皮细胞(AGS)的钙离子相关蛋白钙网织蛋白CRT以及钙 离子结合蛋白CALNUC磷酸化程度发生改变，提示却 可能会影响AGS细胞的钙稳态，通过钙离子通 路影响细胞的增殖或凋亡。目的 研究 作用于人胃腺癌上皮细胞后 ，AGS细胞内钙离子的时序性变 化，以及CagA对AGS细胞内钙离子的影响，进一步揭示却 的致病机制。方法 采用钙离子荧光标记示 踪法，AGS细胞以Fluo-3／AM荧光指示剂负载，特异性地活体标记AGS内的钙离子 ．采用激光共聚焦显 微镜观察分析却 26695及其CagA缺失株 (Hp26695ACagA)分别作用于AGS细胞 lh,2h,3h,4h、5 h,6h后，AGS细胞内钙离子的变化情况。结果 幽门螺杆菌与AGS细胞相互作用 1h，胞内Ca2+部分流 失，5h胞内Ca2+~量流失。l一6h内，Hp26695与Hp26695ACagA作用的AGS细胞荧光强度没有显著 差异。结论 作用会导致AGS细胞内Ca2+~J夺，且与CagA的存在无明显关联性。 【关键词】幽门螺杆菌；人胃腺癌上皮细胞；荧光标记；Ca2+时序性变化 Ca“sequentialchangesofAGScellafterinfectedbyHelicobacterpyloriXIA0DiTAOXiao—xia，ZHANG , Jian—zhong,eta1．NationalInstituteforCommunicableDiseaseControfandPrevention．ChineseCenterfor DiseaseControlandPrevention,Beijing 102206，China．Correspondenceto：ZHANGJian—zhong,Email： zhangjianzhong@iedc．cn A【bstract】BackgroundHelicobacterpylori(H．pylori)infectioniscloselyrelatedwithgastriccancer． ThepathogenicmechanismsofH．pyloriarenotyetclear．Cytotoxin-associatedproteinA (CagA)ishtemain virulencefactorfortypeI-H．pyloriandplaysna importantroleinthediseasesinduced，especiallyintllede— velopmentofgastriccna cer．Previousstudiesshowedthathtephosphorylationdegreeofcalcium-relatedpro— teincalreticulin(CRT)andnucleobindin-2precursor(CALNUC)chnagedsignificnatlyinhmnna gastricade— nocarcinomaepihtelial(AGS)whichinfectedbyH．pylori．TiffsresultsuggestedhtatH．pylorimightaffecthte calcium homeostasisofAGSna dcouldactivateorinhib