人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶 1基因低表达增加肺腺癌细胞对博来霉素敏感性.pdfVIP

中国药理学与毒理学杂志 ２００６年８月； ２０（４）：３１２－３１７ 　　 　 ·３１２· ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ ２００６　　Ａｕｇ； ２０（４）：３１２－３１７ 人８羟基鸟嘌呤ＤＮＡ糖苷酶 １基因低表达增加 肺腺癌细胞对博来霉素的敏感性  吴　媚，张遵真 ，车望军，李　娜 （四川大学华西公共卫生学院环境卫生教研室，四川 成都　６１００４１） 摘要：目的　研究ＤＮＡ碱基切除修复基因人８羟 性在很大程度上限制了其临床应用。研究发现， 基鸟嘌呤ＤＮＡ糖苷酶 １（ｈＯＧＧ１）低表达增加肺腺 ＤＮＡ氧化损伤修复对于肿瘤的形成、治疗及耐药都 癌细胞对博来霉素（ＢＬＭ）的敏感性的作用，为化疗 起着非常重要的作用，临床治疗中常出现的肿瘤细 增敏提供更多的实验依据。方法　以肺腺癌Ａ５４９ 胞耐药性与其 ＤＮＡ氧化损伤修复能力增加有关， 细胞和通过稳定转染ｈＯＧＧ１核酶而获得的ｈＯＧＧ１ ＤＮＡ修复相关酶活性增高也是肿瘤对化疗药物产 低表达的Ａ５４９Ｒ细胞为研究对象，用ＭＴＴ试验和 ［１，２］ 生抗性的一个重要因素 。分子肿瘤学研究提 集落形成抑制试验测定不同浓度 ＢＬＭ处理后两种 示，与ＤＮＡ修复有关分子是化学药物耐药的主要原 细胞的存活率和形成集落的能力；体外微核试验及 ［３，４］ 因之一 ，从研究 ＤＮＡ修复入手，降低肿瘤细胞 单细胞凝胶电泳检测两种细胞微核率及 ＤＮＡ损伤 对ＤＮＡ氧化损伤的修复能力将为肿瘤治疗和耐药 与修复的差异。结果　ＢＬＭ作用下Ａ５４９Ｒ细胞的 性逆转开辟新的途径。人８羟基鸟嘌呤ＤＮＡ糖苷 ＩＣ及集落形成率显著低于Ａ５４９细胞；ＢＬＭ可诱导 酶 １（ｈｕｍａｎ ８ｏｘｏｇｕａｎｉｎｅ ＤＮＡ ｇｌｙｃｏｓｙｌａｓｅ１， ５０ 两种细胞的微核率增高，而在相同浓度下Ａ５４９Ｒ ｈＯＧＧ１）是ＤＮＡ氧化损伤修复途径中的关键酶，本 细胞微核率较 Ａ５４９细胞更高；单细胞凝胶电泳结 文以肺腺癌Ａ５４９细胞和通过稳定转染ｈＯＧＧ１核酶 果显示，ＢＬＭ作用下两种细胞均有不同程度 ＤＮＡ 而获得的ｈＯＧＧ１低表达的Ａ５４９Ｒ细胞为研究对 损伤，Ａ５４９Ｒ细胞的拖尾率和 ＤＮＡ迁移长度显著 象，比较两种细胞在 ＢＬＭ处理后存活率及 ＤＮＡ损 大于 Ａ５４９细胞；损伤后 Ａ５４９细胞修复发生较 伤修复能力的变化，以研究ｈＯＧＧ１低表达影响肺腺 Ａ５４９Ｒ早，与 Ａ５４９细胞相比Ａ５４９Ｒ细胞更不易 癌细胞对ＢＬＭ敏感性的效应，从而为在基因水平进 修复。结论　ｈＯＧＧ１低表达使肺腺癌细胞ＤＮＡ修 行化疗增敏提供更多实验依据。 复能力降低，从而使其对ＢＬＭ的敏感性增强。 关键词：基因表达；人８羟基鸟嘌呤ＤＮＡ糖苷酶； １　材料与方法 博来霉素；腺癌；肺；ＤＮＡ损伤 １．１　试剂和仪器 中图分类号：Ｒ９７９．１ ＢＬＭ，ＮｉｐｐｏｎＫａｙａｋｕ；Ｇ４１８，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ；低熔点 文献标识码：Ａ 琼脂糖，Ａｍｒｅｓｃｏ；噻唑蓝（ＭＴＴ），Ｆｌｕｋａ；溴化乙锭 文 章 编 号：１０００３００２（２００６）０４０３１２０６ （ｅｔｈｉｄｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，ＥＢ），