血管瘤相关J亚群禽白血病病毒ZH-08株的分离与全基因组序列测定.pdfVIP

畜牧兽医学报 2010，41(2)：193—199 ActaVeterinariaetZootechnicaSinica 血管瘤相关J亚群禽 白血病病毒 ZH一08株的 分离与全基因组序列测定 张小桃，史伟伟 ，刘红波，张贺楠 ，廖 明，辛朝安，曹伟胜 (华南农业大学兽医学院 农业部动物疫病防控重点开放实验室，广州 510642) 摘 要 ：本研究从临床表现为典型血管瘤型禽 白血病病例 的广东某 肉种鸡场的病鸡 中，分离到 1株 J亚群禽 白血 病病毒(ALV—J)，命名为ZH一08。利用 ELISA抗原检测、PCR和间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定，结果都呈 阳性。依据ALV-J原型株 HPRS一103前病毒全基因组序列设计并合成3对引物，采用分段扩增的方法完成了分离 株的全基因组序列测定 。结果显示该分离株基 因组序列全长 7597bp，与 已公开的全基 因组序列大小 比较略有差 异，但符合典型的复制完全型反转录病毒 的基 因组结构，基 因序列 中不含 已知致癌基 因。将该分离株的亚群特异 性 gp85基 因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性 比较 ，发现 ZH一08与 YZ9901株相似性最高(93．7 )。 基于 gp85核苷酸序列的系统进化分析表 明：ZH一08株与 SD07LK1株的亲缘关系最近 。本研究为该毒株 的生物学 特性 以及致病机制研究奠定 了基础 。 关键词 ：血管瘤 ；J亚群禽白血病病毒 ；全基 因组序列 ；gp85 中图分类号 ：$852．659．3 文献标识码：A 文章编号 ：0366—6964(2O10)O2Ol93O7 IsolationandtheFull—lengthGenomeSequencingofSubgroupJAvianLeukosis VirusZH一08 IsolateAssociatedwith Hemangioma ZHANG Xiao—tao，SHIWei—wei，LIU Hong-bo，ZHANG H~nan，LIAO M ing， XIN Chao-an，CAO W ei—sheng (KeyLaboratoryofAnimalDiseaseControf．andPreventionoftheMinistryofAgriculture／Collegeof VeterinaryM edicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou510642，China) Abstract：A subgroupJavianleukosisvirus(ALV—J)，designatedasZH一08，wasisolatedfrom broilerbreederflockwithanovelhemangiomacaseinGuangdongProvince．Theidentifiedresults ofELISA test，PCRandimmunofluorescenceassay (IFA)specificforALV—J，wereallpositive． Basedonthepublicfull—lengthproviralgenomesequenceofALV—JprototypestrainHPRS一103， threepairsofprimersweresynthesized，andthefull—lengthproviralgenomeofZH～08isolatewas sequencedbythemethodoffragmentamplification．Thefull—lengthproviralgenornesequenceof ZH一08isolateis7597bp．itssizehasalittledifferencefrom thatofpublishedfull—lengthgenome sequences，butitsstructurecorrespondswithtypicalretroviralgenomestructureforco