不同转移潜能骨肉瘤细胞差异表达基因的筛查.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org ChinJCancerBiother．Feb．2010，Vo1．17，No．1 ·71 · DOI：10．3872／j．issn．1007-385X．2010．01．014 · 基础研 究 · 不同转移潜能骨肉瘤细胞差异表达基因的筛查 李新志 ，孟 琳 ，陈安民 ，郭风劲 ，罗正强 ，曾 衡 (1．三峡大学仁和医院 骨科，湖北 宜昌443001；2．三峡大 学医学院，湖北 宜昌443000；3．华q-科技大学 同济医学院 附属同济医院 骨科，湖北 武汉430030) [摘 要] 目的：研究不同转移潜能骨肉瘤细胞差异表达的基因，筛选骨肉瘤转移相关的基因。方法 ：分别提取低转移骨 肉瘤细胞株M6和高转移骨肉瘤细胞株M8细胞总RNA，采用cDNA基因芯片筛查M6和M8细胞差异表达的基因，杂交信号 用Generationm arrav扫描，结果用 Imagequant5．0软件分析。选择基因芯片筛选到的典型差异表达基因用实时定量PCR进 行验证。结果 ：M6和M8骨肉瘤细胞株差异表达的基因共有330个，其中与低转移组(M6)相比，在高转移组(M8)中显著性 上调表达的基因有 178个 ，下调表达的基因有 152个。其中发生非常显著性上调表达的基因43个 ，发生非常显著性下调表达 的基因49个。差异基因主要包括与细胞增殖相关的基因，提示与M8细胞增殖受抑相关 ；其次是与基因表达调控及信号转导 相关的基因，提示这些基因和肿瘤转移有关联性。结论 ：基因芯片方法对于筛选骨肉瘤转移相关基因有独特的优势 ，MG63 细胞M8亚株中筛查到显著性上调的基因43个，显著性下调的基因49个 ，与骨肉瘤的转移有关。 [关键词] 骨肉瘤转移 ；cDNA芯片；基因表达谱 [中图分类号] R738．1；R730．2 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2010)01-0071-06 Screeningofdifferentiallyexpressedgenesinosteosarcomacelllineswithvarious metastaticpotentialities LIXin—zhi，MENGLin，CHENAn—min，GUOFeng．jin，LUOZheng—qiang，ZENGHeng(1．DepartmentofOrtho— paedics，RenheHospital，ThreeGorgesUniversity，Yichang443001，Hubei，China；2．MedicalofThreeGorgesUniver— sity，Yichang443001，Hubei，China；3．DepartmentofOrthopaedics，AffiliatedTon~iHospital，Ton~iMedicalCol- lege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430030，China) [Abstract] Objective：Toinvestigatethedifferentiallyexpressedgenesinosteosarcomacelllineswithvariousmetastatic potentialities，andtosemenfornew candidategenesrelatedtometastasisofosteosareomas．M ethods：ThetotalRNAsof alowlymetastaticandahighlymetastaticosteosareomacelllines(M6andM8)wereextracted．Differentiallyexpressed genesinthetwoosteosarcomacel1lineswerestudiedbycDNA microarray．Thehybridizationsignalswerescannedwitha Generation IIIarrayscannerandanalyzedbyImagequant5．0software．Typicaldifferentiallyexpressedgeneswerefurther verifiedbyreal—timequantitativePCR．Results：There