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* * 专题3 植物组织培养技术专题整合 植物组织培养所用的培养基营养丰富，加上培养的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。 植物组织培养过程中污染的预防 1．污染有两种类型 (1)细菌污染。菌斑呈黏液状，界限比较明显，一般接种后1～2 d即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。一般是由接种人员造成的。 (2)真菌污染。菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子，接种后3～10 d才能发现。主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的。 2．组织培养过程各环节的防污染措施 操作过程要求 注意事项 防止外植 体带菌　 ①选择好外植体采集时期和采集部位。②在室内或无菌条件下进行预培养。③外植体严格灭菌。做灭菌效果试验，多次灭菌和交替灭菌。 保证培养基 及接种器具 彻底灭菌　 ①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口。②检查封口膜是否有破损。③扎瓶口要位置适当、松紧适宜。④保证灭菌时间和高压锅内温度。⑤接种工具使用前彻底灭菌。⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。 操作人员严 格遵守无菌 操作规程　 要规范着装，操作过程中不说话等。 保证接种与培 养环境清洁　 ①污染瓶经高压灭菌后再清理。②接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒。③定期对培养室消毒、防止高温。 (1)微型繁殖 微型繁殖就是用于快速繁殖优良品种的植物组织培