提高昆虫杆状病毒表达系统重组蛋白表达水平的技术.pdfVIP

委亲遍窳 第41卷 第3期 2010年8B · 6 · BulletinofSericuhure Vo1．41No．3Aug．，2010 提高昆虫杆状病毒表达系统重组蛋白表达水平的技术 于少芳，吴小锋 (浙江大学动物科学学院，浙江 杭州 310029) 摘 要：昆虫杆状病毒表达系统已广泛用于各种重组蛋白的生产。然而，由于各种因素重组蛋白的表达量远远达不到 理想的水平。提高重组蛋白的表达水平成为提高昆虫杆状病毒表达系统效率的核心问题。根据 目前的研究，提高外源基 因表达水平的技术主要包括抑制 目的蛋白降解、合理调控 目的基因的转录、优化启动子类型以及利用活体昆虫而非培 养细胞，如用家蚕幼虫或蛹进行表达等。这些技术也为家蚕成为更加高效的生物反应器奠定了基础。 关键词：昆虫杆状病毒表达系统；重组蛋白；表达水平 中图分类号：$884．5 文献标识码：A 文章编号：0258-406912010]03-006-04 TechniquesforEnhancingExpressionofRecombinationProteininInsect BaculovirusExpressionSystem YU Shao-fang．W U Xiao-feng (CollegeofanimalScience，ZhejiangUniversity,Hangzhou310024China) Abstract：InsectBaculovirusExpressionVectorSystem (BEVS)hasbeenwidelyusedinavarietyof recombinantprotein production．However，the expression offoreign protein islimited dueto various factors．High—levelexpression ofrecombinantproteinsbecomesthe core issue of improving the efficiency ofBEVS．Sofar，themaintechniquesforimprovingtheexpressionofforeigngeneincluded theinhibition ofprotein degradation，positiveregulationofforeign gene transcription，optimization of promotersandutilization ofliveinsectratherthancelllines，suchassilkworm larva orpupaashost． Thesetechniquesalsolayafirm foundationofrdevelopingsilkwomr asefficientbio-reactor． Keywords：Insectbaculovirusexpressionvectorsystem；Recombinantprotein；Rxpressionlevel 利用转基因动物(包括绵羊，山羊，猪，大鼠，奶 行表达的一个生产系统。因为昆虫细胞与哺乳动物 牛等)生产各种重组蛋白和工程疫苗是近年来的热 细胞翻译和翻译后蛋白修饰的模式与能力相似，包 点之一。但是，转基因动物研究过程中存在许多问 括糖基化、磷酸化和蛋白其他后加工等。在杆状病毒 题，例如生产重组蛋白所需时间长、生产量过低等。 表达系统中，培养的细胞和昆虫幼虫或蛹都可用于 相对而言，昆虫细胞表达系统(包括杆状病毒表达系 重组蛋白的生产，多数情况下，重组蛋白被加工、修 统和稳定转化细胞系统)所需时间较短，效率更高， 饰并运送到细胞中合适的位置，获得所期望的生物 特别