瘤胃微生物生态研究方法评述.pdfVIP

24卷7期 草业科学 7暑 V01．24，No．7 PRATACULTURALSCIENCE 7／2007 瘤胃微生物生态研究方法评述 淡瑞芳1，张海涛1，龙瑞军2”，鱼小军4 (1．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州225300，2．兰州大学草地农业科技学院，甘肃兰州730020， 8．中国科学院西北高原生物所，青海西宁810008；4．甘肃农业大学草业学院，甘肃兰州730070) 摘要：瘤胃微生物生态研究方法主要经历了微生物纯培养、混合培养、微生物分子生物学技术[(从瘤胃中提 取DNA，进行PCR一16S rDNA(rRNA)技术]、变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术)，在不同程度上揭示了瘤胃 微生物群落丰富的多样性和生态功能。但由于各种方法本身的局限性，限刺了人类对瘤胃微生物的全面了 解，现代生物技术争传统微生物研究方法的配合将为瘤胃微生物生态研究提供较好的前景。 关键词：瘤胃微生物；纯培养；混合培养；生物技术 中图分类号：Q939．940．8 文献标识码：A 文章编号：1001—0629(2007)07—0077—06 20世纪70年代Cuthbertson就论述了反刍 动物对人类食品的重要性，但草食家畜本身并不 究发现，每1mL瘤胃内容物中有细菌1010～1011 能分解纤维类物质，而需要完全依赖栖居在其消 个、原虫105～106个。 化系统中的大量微生物。由于反刍动物瘤胃中较 虽然已知微生物间有许多互营类型和协同／ 为恒定的营养、水分、酸碱度、渗透压、温度等条件 拮抗关系[3]，但是标准的分离程序不能模拟大多 为各种微生物生长提供了良好的环境，其微生物 数真实的生态环境[4]。如，有些细菌菌株产生的 数量巨大、种类繁多，尤其包括了大量重要的纤维 似蛋白质对其它菌株有抑制作用[5t6]。因为在瘤 素分解微生物，瘤胃微生物最本质的问题是微生 胃中这种抑制者似乎是无所不在的[7’8]，但是，抑 制作用各不相同[。]，体内它们对微生物生态及其 物生态学的问题。本文旨在对此领域的研究做一 相互关系的影响，对饲料的降解和微生物氮的转 回顾，并介绍2种新方法，对瘤胃微生物生态的研 换仍不清楚。 究做出展望。 随着人们对瘤胃微生物原位生存状态的研 1瘤胃微生物分离培养 究，发现常规的分离培养方法很难全面地评估微 传统的瘤胃生态系统中微生物群落多样性及 生物群落多样性。从瘤胃中简单提取和厌氧培养 结构分析主要通过分离培养、计数和分类鉴定，然 计数，不能得到微生物在瘤胃生态系统中的生活 后通过一般的生物化学性状，或者特定的表现型 特征和生态功能的信息。而且纯培养方法和原理 来分析瘤胃微生物，这方面的研究在1958年前已 大多源于医药微生物和土壤微生物，有些方法对 取得相当进展。20世纪50一80年代，微生物学 瘤胃微生物研究并不很适合，如在自然瘤胃生态 家致力研究瘤胃细菌的培养[1]，用这种方法收集 环境下许多瘤胃微生物处于动态营养状态，而