变性梯度凝胶电泳法的研究断奶仔猪粪样细菌区系变化.pdfVIP

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 ’( )! /’ )! 年 月 #$$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,+-. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 变性梯度凝胶电泳法研究断奶仔猪粪样细菌区系变化 朱伟云 姚 文 毛胜勇 （南京农业大学消化道微生物研究室 南京 #1$$20 ） 摘 要：利用 和 技术分析了 头仔猪在断奶后其粪样细菌区系的变化。粪样细 FGH IJJ; 1# 菌13K LI/* 的3 M % 可变区经FGH 扩增，扩增产物经IJJ; 电泳后再进行相似性分析。结 果表明，仔猪断奶当天粪样 IJJ; 谱带少，同窝仔猪间图谱相似。断奶后，随着断奶时间的推 移，每头仔猪的IJJ; 图谱带逐渐增多，变得复杂和多样，仔猪个体间IJJ; 图谱差异逐渐增 大。仔猪是否同窝以及所采食日粮类型对IJJ; 图谱没有明显影响。相似性分析还表明，日 粮中添加寡果糖的仔猪在断奶后第1 周，其粪样微生物区系变化迅速，而后缓慢。 关键词：变性梯度凝胶电泳，断奶仔猪，粪样细菌 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） N2% * $$$173#$2 #$$ $!7$0$7$3 仔猪肠道微生物区系随宿主日龄增加逐渐变得复杂多样，且形成一个相对动态平衡、 稳定的微生态系统，对宿主的生长和健康起着重要作用。但报道认为，自然界中很多微生 ［，］ 物不能用现有的培养方法进行分离和鉴定或是不能培养1 # ，而且仔猪胃肠道中大部分微 生物的生长需要厌氧环境，因此人们对仔猪肠道及粪样微生物及其变化规律的了解甚少。 近年来，基于13K LH/* 的分子生物学技术促进了微生态研究的发展，特别是被称为 指纹技术的变性梯度凝胶电泳法（ ， ）能有效 I/* I6B9.+L=B, JL9O=6B. J6( ;(6.L’P?’L6-=- IJJ; 分析复杂微生物群落及其多样性且无须培养微生物，而越来越受到重视。IJJ; 基本原 理是长度相同而碱基组成不同的I/* 序列在不同变性条件（如尿素浓度）下变性，在变性 梯度凝胶上特定位置形成泳带。该技术自从 122 年被Q+A6L 等首次用于分析土壤环境 ［］ ［］ 的微生物区系以来 ! ，已迅速用于其它环境微生态和人肠道微生态的研究 。 ［］ 0 K=P-’B 等 分析了IJJ; 技术在研究猪肠道微生物区系方面的应用条件，并比较了 断奶前仔猪、断奶后仔猪与肥育猪等不同个体的肠道和粪样细菌群体组成结构，但是该研 ［］ 究忽视了这些猪之间本身存在的个体差异的影响。 3 K=P-’B 等 利用FGHR IJJ; 技术分 析了断奶仔猪饲喂外源乳酸菌后第 天粪样细菌群体，并对其中一头仔猪的粪样进行了 10 跟踪研究。本研究采用