烧伤临床鲍氏不动杆菌分离株生物膜内菌aba Ⅰ基因表达的变化.pdfVIP

·烧伤感染· 烧伤临床鲍氏不动杆菌分离株 生物膜内菌abaI基因 表达的变化 向军 孙珍 杨新刚 郇京宁 目的 I表 【摘要】 了解烧伤临床鲍氏不动杆菌分离株生物膜形成过程中，密度感应基因aba 达变化及其对生物膜ECM和细菌耐药性的影响。方法2011年1一10月，收集上海交通大学医学 院附属瑞金医院烧伤住院患者创面、血液和静脉导管来源的鲍氏不动杆菌耐药菌6株、敏感菌5株。 h 以鲍氏不动杆菌标准菌株ATCC19606为参照。(I)临床分离株和标准菌株体外常规培养10、24、48 后，经碘化丙啶染色，用激光扫描共聚焦显微镜观察生物膜厚度。(2)采用试管培养法，将临床分离 株和标准菌株振摇培养10、24、48h，培养液内漂浮细菌为游离菌，黏附于试管壁的生物膜内细菌为膜 内菌。采用实时荧光定量PCR技术检测各菌株中abaI基因及pgaB基因的相对表达量(标准菌株 基因表达丰度设为1)。对实验数据进行方差分析。 结果 (1)鲍氏不动杆菌临床分离株体外培养 10、24、48 4-0．6)、(31．7± h，生物膜厚度均超过标准菌株，其中耐药菌株生物膜厚度分别为(28．8 1．1)、(38．i±3．1)斗m，明显高于敏感菌株[(17．14-0．4)、(20．14-1．6)、(25．84-1．7)斗m，F值分别 为1274．38、206．60、61．73，P值均小于0．05]。(2)膜内菌：体外培养10、24、48h，耐药菌株abaI表 4-1．7、25．74-3．5、9．84-3．6，均高于敏感菌株(2．74-1．0、15．04-3．5、4．74-3．2，F值 达量分别为6．6 4-1．1、44．5± 分别为21．82、25．24、6．22，P值均小于0．05)；耐药菌株pgaB的表达量分别为37．4 3．6、33．14-11．5，明显高于敏感菌株(14．64-0．8、20．04-6．9、18．74-6．8，F值分别为1488．44、57．26、 h，耐药菌株abaI表达量均与敏感菌株接 6．01，P值均小于0．05)。(3)游离菌：体外培养10、24、48 4- 4-3．8、12．5 近(F值分别为0．24、2．33、0．11，P值均大于0．05)；耐药菌株pgaB表达量分别为13．8 2．9、23．74-2．1，明显高于敏感菌株(7．0±5．9、5．04-1．3、15．64-6．7，F值分别为5．44、28．42、7．76， I表达量均多于游离 P值均小于0．05)。(4)膜内菌与游离菌的耐药菌株比较：膜内菌各时相点aba h多于游离菌 菌(，值分别为43．69、286．61、9．98，P值均小于0．05)，膜内菌pgaB表达量在10、24 (，值分别为214．26、283．20，P值均小于0．05)。(5)膜内菌与游离菌的敏感菌株比较：膜内菌 aba I表达量在培养24h多于游离菌(F=70．28，P0．05)，pgaB表达量在lo、24h多于游离菌 (F值分别为8．03、22．62，P值均小于0．05)。结论烧伤I临床鲍氏不动杆菌分离株生物膜形成过 程中，耐药菌株的密度感应基因abaI表达明显增多，可能引起pgaB基因表达上调，导致细菌ECM 及生物膜形成增加、耐药性增强。 aba 【关键词】 烧伤；感染；鲍氏不动杆菌；生物膜；抗药性；