重庆市水产品中副溶血性弧菌分离株的毒力基因研究.pdfVIP

第38卷第4期 西南师范大学学报(自然科学版) 2013年4月 V01．38No．4 ofSouthwestChinaNormal ScienceEdition) 2013 Journal University(Natural Apr． 文章编号：1000—5471(2013)04—0069—06 重庆市水产品中副溶血性弧茵分离株 的毒力基因研究① 侯立杰1， 李 林2 1．西南大学食品科学学院，重庆400715；2．两南大学，重庆400715 摘要：目的：了解重庆市副溶血性弧菌分离株的毒力基因、血清型以及耐药性，为防治副溶血性弧菌引起的食源性 疾病提供依据．方法：采用PCR方法检测溶血素基因，并结合药敏试验以及血清分型进行综合分析．结果：323份 水产品样品中共分离出的3j株副溶血性弧菌，其tdh和trh基因携带率分别为14．29％、2．86％，血清群主要为： 03群、05群、01群；14株临床分离株主要为()1群、03群．两组不同来源的菌株均对头孢噻肟、环丙沙星、诺氟 沙星敏感，对氨苄西林均有较强的耐药性．结论：重庆地区水产品中副溶血性弧菌的毒力基因携带率较低，但是血 清型呈现多样性，且耐药性较严重．因此存在发生副溶血性弧菌食物中毒的潜在危险． 关键词：副溶血性弧菌；毒力因子；血清型；药敏试验 中图分类号：TS207．7 文献标志码：A 副溶血性弧菌(Vibrio 洋性细菌Jj，主要生存于近海岸的海水、海底沉积物以及鱼、虾、贝等体内，除海产品外，畜禽肉、咸菜、 咸蛋、淡水鱼等都发现有VP的存在卫一．由VP引起的食物中毒占日本全国食物中毒例数的20％～ 3 30％L4]，欧洲和北美地区也多次发生过VP食物中毒事件^．研究表明人们进食被VP污染而未煮透的 食物可引起胃肠黏膜的急性炎症反应、败血症甚至死亡，其原因可能为溶血素、肠毒素和侵袭性等致病因 子的作用邸一，近年来，很多国家对其在食物中的检出限进行了严格的规定∽j．因此，了解副溶血性弧菌的 污染现状，准确、快速测定分离株的毒力具有普遍意义． 目前较为常用的副溶血性弧菌快速检测方法主要有ELISA、DNA指纹图谱、基因探针、基因芯片、 VP快速测试片等。8一，其中聚合酶链式反应(PCR)技术在实际应用中由于其操作简便、准确度较高而得到 cfu／mI．，特异性强、 广泛认可．杨平等。9一使用PCR技术快速检测食品中4种致病菌，经增菌后检出限达1 离株和14株临床分离株的毒力基因进行检测，并结合血清分型和药敏实验进行综合分析． 1材料与方法 1．1 材料 1．1．1 菌株来源 庆市疾病预防控制中心微生物检验所提供． 2—10—17 ①收稿日期：201 作者简介：侯立杰(1987一)，女，天津市人，硕士研究生，主要从事食品安全与质量检验方面的研究 万方数据 70 西南师范大学学报(自然科学版) 第38卷 实验组菌株：35株水产品分离株自重庆市各大农贸市场、餐馆、超市、酒店共323份样品中分离所得， 均经GB／T4789．7--2008《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》标准方法检测确认为副溶血性弧菌． 对照组菌株：14株临床分离株为重庆市疾病预防控制中心微生物检验所保存菌株． 1．1．2培养基及试剂 TCBS琼脂培养基、3．5％NaCl碱性蛋白胨、3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂：北京路桥技术有限公司； 科玛嘉培养基：郑州博赛公司；PCR所使用试剂及引物：上海生物工程有限公司；11种O群分群血清：由 日本生研所生产；药敏纸片()XOID，M—H琼脂OX()ID，以上试剂均在有效期内使用． 1．1．3仪器与设备 DYY DocXRS凝胶成像仪：美国伯乐公司；微量移液器：法 11型电泳仪：杭州汇尔仪器有限公司