芍药苷对MPP^＋所致大鼠黑质脑片多巴胺能神经元损伤的保护作用.pdfVIP

· 204 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2010Feb；26(2)：204～8 芍药苷对MPP+所致大鼠黑质脑片 多巴胺能神经元损伤的保护作用 曹碧茵 ，孔 岩 ，徐 斋 ，杨亚萍 ，刘春风 (苏州大学 1．附属第二医院神经内科、2．神经科学研究所衰老与神经疾病实验室，江苏 苏州 215004) 中国图书分类 号：R-332；R284 泛的影响，并能改善PD模型大鼠的行为学改变…， R 345．47 但是其神经保护作用的机制仍未完全明了。 -突触 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2olo)o2—0204—05 核蛋 白(仅．synuclein，一syn)是Lewy小体的主要成 摘要：目的 研究芍药苷 (paeonifiorin，PF)对 MPP 所致大 分之一，与PD的发生发展有着密切联系L2I3。本研 鼠黑质脑片多巴胺能神经元损伤的保护作用，并观察 PF对 究利用大鼠黑质器官型脑片模型，研究PF对环境 d—synuclein(仅一syn)mRNA表达水平的影响。方法 离体培 毒素MPP所致多巴胺能神经元损伤的保护作用， 养sD大鼠黑质器官型脑片，培养的d10给予不同浓度的 并观察其对 ．synmRNA转录水平的影响。 MPP (0．1、0．5、1．0mmol·L )处理 24h，并在0．5mmol· L MPP 处理的基础上，给予 1txmol·L 或 10I~mol·L 1 材料与方法 的PF进行干预。免疫组化法计数黑质致密部酪氨酸羟化酶 1．1 实验动物 健康SD大鼠，出生5—7d，早6 (tyrosinehydroxylase，TH)阳性细胞数，定量 RT—PCR法检测 不限，由苏州大学实验动物中心提供。 — synmRNA的表达丰度。结果 MPP (0．1、0．5、1．0mmol 1．2 主要试剂 芍药苷 (中国药品生物制品检定 · L )处理导致黑质致密部TH 细胞数较正常对照组减 所)；MPP (Sigma)；DMEM培养基、F12培养基、胎 少 ，差异均有统计学意义(P0．05或P0．01)；MPP (0．5 牛血清、马血清、B一27Supplement、N-2Supplement mmol·L。。)使 仅一synmRNA的表达水平 明显升高 (P (Gibeo)；兔抗 鼠酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxylase， 0．01)。PF(10txmol·L )有效增加了TH 细胞的数量 (P TH)多克隆抗体 (Chemicon)；荧光定量 RT—PCR试 0．01)，并明显下调了 一synmRNA的表达 (P0．05)。结 剂盒(宝生物工程有限公司)；Millicell—CM微孑L膜插 论 PF能有效拮抗 MPP 导致 的多巴胺能神经元受损死 件(0．4Ixm，Millipore)。 亡 ，其机制可能与下调0一【syn的表达有关。 人工脑脊液成分 (mmol·L )：NaC1124，KC1 3．3，KH2PO41．2，NaHCO326，CaC122．5，MgSO42．4， 关键词：芍药苷；多巴胺能神经元；黑质脑片；MPP ；—synu— clein；大鼠 葡萄糖 10。脑片培养液：① DF液：50％ DMEM， 50％ F12，