苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株p21和survivin基因表达的影响.pdfVIP

· 178 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2010Feb；26(2)：178～81 苯丁酸钠对人舌鳞癌 Tca8113细胞株 p21和 survivin基因表达的影响 潘德顺 ，陈伟强 (广东药学院1．药理学教研室、2．病理生理学教研室，广东广州 510006) 中国图书分类号：R329．25；R329．28；R394．2；R73-3； 析 SPB对 p21和 survivin基因表达的影响以及二者 R 739．860．22；R977．6 之间的关系，为舌癌的临床治疗提供理论依据。 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2010)02—0178—04 1 材料与方法 摘要：目的 研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细胞株的生 1．1 材料 苯丁酸钠购 自Sigma公司；人舌鳞癌 长、凋亡及其对p21和 survivin分子表达的影响。方法 应 Tca8113细胞株购 自上海 中国细胞库；碘化丙啶 用MTr法检测苯丁酸钠对人舌鳞癌 Tca8113细胞株的抑制 (PI)，异硫氰酸荧光素(FITC)标记的磷脂酰结合蛋 作用，采用流式细胞仪研究苯丁酸钠对人舌鳞癌Tca8113细 白(Annex．V)购 自南京凯基生物有限公司；兔抗人 胞株的细胞周期阻滞和诱导凋亡作用 ，应用 Westernblot和 p21，survivin一抗及相关二抗，DAB显色试剂盒来 RT—PCR检测p21和 survivin基因的转录和表达。结果 实 验表明苯丁酸钠对Tca8113细胞株增殖有明显的抑制作用 ； 自上海康生物工程有限公司；TRIzol试剂为 Invitro． 流式细胞仪检测显示苯丁酸钠诱导Tca8113细胞株G 期阻 gen公司产品；RT．PCR试剂盒购 自Promega公司。 滞和细胞凋亡；苯丁酸钠能使p21的mRNA及蛋白质表达升 1．2 细胞培养及实验分组 以含 100ml·L。。胎牛 高，同时survivin的mRNA及蛋白质表达下降。结论 苯丁 血清的RPMI1640培养基，于37℃、饱和湿度下、 酸钠通过刺激p21表达增加和抑制 survivin的表达，从而抑 5％CO 培养箱中培养，细胞呈单层贴壁生长，每2 制Tca8113细胞株增殖，诱导细胞 G 期阻滞和细胞凋亡； ～ 3d传代一次。取对数生长期细胞；根据以往的 并且p21mRNA水平的上升和survivinmRNA水平的下降变 研究，当苯丁酸钠浓度 1mmol·L～，作用很弱，当 化呈负相关 ( =一0．548，P0．01)，二者蛋白表达的变化 浓度 3mmol·L 时，作用过于强烈，实验分为① 亦如此 (r=一0．514，P0．01)。 肿瘤细胞对照组：细胞不作任何处理；② 苯丁酸钠 处理24h组：苯丁酸钠 的浓度为3mmol·L～，处理 关键词：苯丁酸钠；p21；survivin；Tea8113细胞株；凋亡；基因 时间为24h；③ 苯丁酸钠处理48h组：苯丁酸钠的 表达 浓度为3mmol·L～，处理时间为48h。 1．3 MTT法检测苯丁酸钠对 Tca8113细胞生长抑 苯丁酸钠 (sodiumphenylbutyrate，SPB)是一种