RNA干扰技术抑制卵巢上皮性癌耐药细胞Topo Ⅱα基因表达并逆转耐药的体外研究.pdfVIP

Q堑燮鱼埋!型，墨!匹!翼地!；Q塑：!丛丝：堕生2 生堡塑芒叠苤盍!Q堕生!旦筮丝鲞筮2塑堡塾也i ．基础研究． RNA干扰技术抑制卵巢上皮性癌耐药细胞 TopoⅡOt基因表达并逆转耐药的体外研究 何静李力唐步坚张玮黎丹戎王琪 【摘要】目的探讨RNA干扰技术抑制卵巢上皮性癌(卵巢癌)耐药细胞TopoⅡa基因的表达 II 是否能逆转耐药。方法(1)设计并筛选针对TopoOt基因的、沉默效果最佳的小分子干扰RNA IIOt 至受试细胞，建立稳定转染重组质粒的细胞ToposiRNA(+)SKOV3／DDP。(2)采用RT-PCR技术 和蛋白印迹法测定稳定转染细胞中TopolIⅨmRNA和蛋白的表达；分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法、 流式细胞仪和高效液相色谱法测定Topeil理RNA干扰前后细胞的耐药指数、细胞周期和细胞内顺铂 II q Ot基因的表达，TopeII仅siRNA(+)SKOV3／DDP和SKOV3／DDP细胞中Top01ImRNA的表达水 II 平分别为0和0．92±0．08；两种细胞中TopoOt蛋白的表达水平分别为0．51-t-0．04和1．95±0．09， Ot II 两者比较，差异有统计学意义(P0．01)。(2)SKOV3／DDP细胞转染ToposiRNA后耐药指数下 Ot 降，TopoIIsiRNA(+)SKOV3／DDP和SKOV3／DDP细胞的耐药指数分别为3．46和5．05，两者比较， 差异有统计学意义(PO．05)。(3)TopolIasiRNA(+)SKOV3／DDP细胞的G0／G。期、G2／M期细胞 IIOt 比例较SKOV3／DDP细胞增加，s期细胞比例减少(P均0．05)。(4)ToposiRNA(+)SKOV3／ h后，其顺铂含量(157．20ng)较SKOV3／DDP细胞(63．99ng)升 DDP细胞经20斗g／“顺铂处理24 11 高，两者比较，差异有统计学意义(P0．05)。结论阻断卵巢癌耐顺铂细胞中Topoa基因的表达 能逆转其对顺铂的耐受性。 【关键词】 卵巢肿瘤；RNA干扰；抗药性，多药；顺铂；DNA拓扑异构酶类，Ⅱ型 of and of in resistant Iulfibition multi-drug TopoII瑾geneexpressionreversingdrug懈istance ovariancancercells interferenceinvitroHE Bu- epithelial induced、坶?IINA 3if晤．uU，TANG Tumor W威，LIDan·rong，WANGQiDepartmentofGynecologicOncology，A够liatedHospital mn．zHANG of Medical