苜蓿花药培养再生植株染色体倍性检测研究.pdfVIP

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2017-08-28 发布于江西
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苜蓿花药培养再生植株染色体倍性检测研究.pdf

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第18卷第5期草地学报 2010年9月 V01．18 No．5 ACTA Sep． 2010 AGRESTIASINICA 苜蓿花药培养再生植株染色体倍性检测研究耿小丽1，魏臻武2，姚喜红2，赵艳2 225009) (1．甘肃农业大学草业学院，甘肃兰州730070；2．扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州摘要：本试验采用流式细胞仪对苜蓿(M甜imgDsn￡i御L．)F．代杂种花药培养再生植株进行染色体倍性检测。旨在建立高效的苜蓿花药培养体系。提高苜蓿单倍体的诱导效率，寻求一种快速简便的苜蓿倍性检测方法。检测结果为流式细胞仪矩形图上清晰地检测出二倍体、三倍体、四倍体以及二倍体加四倍体的嵌合体。50株苜蓿花药再 mmol 1株。本文还讨论了苜蓿花药培养体系的建立。优化，以及筛选出了适宜制作苜蓿细胞悬浮液的缓冲液(15 ·L_1 mmol·L-1mmol·L一1 mmol·I。一1 mmol·L一1 Tris—HCl(pH7．5)；80KCl；20 NaCl；2 EDTA—Naz；15 8- mm01．L_1 Mercaptoethanol；O．1％(V／V)TritonⅪ100；O．5 Spermine·4HCl)及其流式细胞仪检测苜蓿倍性的适应性程序。关键词：苜蓿花药培养；再生植株；倍性检测；流式细胞仪中图分类号：S541．9；S335．1文献标识码：A 文章编号：1007一0435(2010)05一0714一05 AntherCultureof s口ffy口L．and detection． MPdfcngo Ploidy GENG Zhen—wu2，YA0 Yan2 Xiao—lil，WEI Xi—hon92，ZHAO of (1．CollegeGrasslandScience，GansuAg“cultural Province University，Lanzhou，Gansu730070。China； ofAnimal Province 2．College ScienceTechnique，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu225009，China) levelsof fromantherculturein deter— Abstract：P10idyF1hybridplants，derived Med主c口gosa￡i抛L．，were mined ofthe wastoseekafastandreliablemethodforDNA byflow—cytometricanalysis．Purposestudy detectiontoestablishaneffective ofantherculturewhile inductionin ploidy