利福布汀抗结核分枝杆菌活性及其耐药性与rpoB基因突变关系的探讨.pdfVIP

利福布汀抗结核分枝杆菌活性及其耐药性 与rpoB基因突变关系的探讨 韩喜琴 黄海荣 李艳静 于霞 高静韬 毕志强 初乃惠 李亮 马玙 [摘要] 目的 比较利福平和利福布汀的体外抗MTB活性，分析其交叉耐药性，评价利福平和 利福布汀耐药性与rpoB突变的关系。方法 采用微量平板AlamarBlue检测(MABA)法，检测利福 平和利福布汀对MTB临床分离菌株168株的抗菌活性，并对其rpoB基因核心区进行DNA序列测定。 两组间基因突变率的比较采用x2检验。结果66株利福平敏感菌株均对利福布汀敏感(MIC≤ 0.125mg/L)，未检测到rpoB基因耐药决定区存在突变；102株利福平耐药菌株中有76株同时对利福 布汀耐药(MIC＞0.5mg/L)，交叉耐药率为74.5％(76/102);26株MIC≤4mg/L的利福平耐药菌株 仍对利福布汀敏感(MIC≤0.5mg/L)；516、526和531位点的氨基酸改变与利福平和利福布汀耐药均 有关，而511和533位点的氨基酸改变可能仅与利福平耐药有关，利福布汀耐药菌株的rpoB基因突 变率(92.1％，70/76)显著高于利福布汀敏感菌株(23.9％，22/92)，差异有统计学意义(x2=78.12， P＜0.05)。结论 对利福平低度耐药(MIC≤4mg/L)的MTB仍对利福布汀敏感。MTB的rpoB基因 突变可用于利福平耐药性检测，且对检测利福布汀的耐药性也有参考意义。 利福布汀；利福平；抗药性，细菌；微生物敏感性试验；DNA突变分析 Analysisoftheantimycobacterialactivitiesofrifabutinandtherelationshipbetweendrug-resistance andrpoBmutationsofMycobacteriumtuberculosis HANXi-qin HUANGHai-rongLIYan-jing YUXiaGAOJing-taoBIZhi-qiangCHUNai-hui,LILiang,MAYu DepartmentofTuberculosis, BeijingTuberculosisandThoracicTumorResearchInstitute,Beijing101149,China [Abstract] Objective Tocomparetheantimycobacterialactivitiesofrifampicin(RFP)and rifabutin(RBT),andtoevaluatethecorrelationbetweenRBTresistanceandgeneticalterationsintherpoB gene.Methods Themicroplate-basedalamarblueassay(MABA)methodwasperformedtodetectthe antimycobacterialactivitiesofRFPandRBTin168strainsofMycobacteriumtuberculosis(M.tuberculosis). Meanwhile,wealsoanalyzedthe81bpcoreregionofrpoBgenebyDNAsequencing.Therateofgene mutationswasanalyzedbychi-squaretest.Results RBTwassensitiveforallofthe66RFP-sensitive strainswithnomutationsin81bpcoreregionofrpoBgene.Butofthe102RFP-resistantstrains,76strains werealsoresistanttoRBT.CrossresistancebetweenRFPandRBTwas74.5％ (76/102).Alterationsat codons516,526,531intherpoBgenecorrelatedwithresistancetobothRFPandRBT.Whilepoint mutationsatcodons511and533possiblyinfluencedthesusceptibilitytoRFPbutnottoRBT.Themutation rate(92.1％,70/76)ofrpoBgeneofRBT-resistantstrainswassignificantlyhigherthant