化疗药体外干预诱导人乳腺癌细胞产生耐药性的研究.pdfVIP

·1456‘ 中国药理学通报Chinese Bulletin2009 PharmacologicalNov；25(11)：1456～9 化疗药体外干预诱导人乳腺癌细胞产生耐药性的研究 马晓峰，张莲芬，屈琳，金坚 (江南大学医药学院细胞与分子药理研究室，江苏无锡214122) 中国图书分类号：R329．24；R394．2；R737．902．2；浓度冲击法心’3]。迄今对于MDR的研究主要集中 R737．905．3：R979．1 于耐药相关蛋白及其基因表达差异的分析，并认为 文献标识码：A文章编号：1001—1978(2009)11—1456—04 P糖蛋白(P．gP)在其中起重要作用。针对以上实 摘要：目的研究化疗药物高浓度冲击法和低浓度干预对乳 验，国内外许多研究人员建立或引进了MCF-7耐阿 腺癌细胞MDA—MB-231多药耐药性的影响。方法采用化 疗药物紫杉醇、阿霉素高浓度冲击和紫杉醇低浓度短期干预 MDA—MB一231细胞，SRB法检测细胞药敏性改变；HE染色检 OVCAR一8污染，由该细胞建立的阿霉素耐药细胞株 测细胞形态；免疫细胞化学检测P．gP蛋白表达变化；RT- PCR检测MDRI基因表达。结果阿霉素高浓度冲击后细 胞未存活，紫杉醇高浓度冲击后细胞能存活并最终稳定生长 细胞株的代表性受到质疑HjJ。为此，本实验通过 (MDA-MB·231／a)，SRB法检测Ic50发现该细胞药敏性与野 阿霉素和紫杉醇的高浓度冲击法和紫杉醇低浓度短 生型细胞(MDA—MB-231／w)无差异；紫杉醇低浓度短期干预 期干预研究乳腺癌细胞MDA．MB-231药物敏感性 后(MDA—MB-231／b)SRB法检测发现该细胞对多种化疗药 的变化和多药耐药蛋白P-gP及其基因MDRl的表 的IC∞比野生型略有提高；免疫细胞化学显示MDA-MB一 达变化，为建立该细胞的耐药模型提供实验依据，同 231／a P-gP表达与野生型无差异，MDA·MB-231／bP-gP表达 时也为细胞在化疗药物胁迫条件下的反应的研究提 略有提高；RT．PCR检测发现MDA—MB-23l／b中MDRI基因 供参考‘引。 表达高于MDA—MB-231／w。结论化疗药物高浓度冲击法 1材料与方法 无法获得MDA—MB一231的耐药细胞，低浓度短期干预可以略 微提高细胞的耐药性，提示低浓度持续诱导法可以获得 1．1 材料野生型人乳腺癌细胞系MDA—MB-231／ MDA·MB-231的耐药细胞。 W引自中科院上海细胞库。RPMI1640为Gibco公 司产品。胰蛋白酶和小牛血清为上海冠羽生物公司 关键词：多药耐药；人乳腺癌细胞；SRB法；免疫细胞化学； 产品。鼠抗人P-gP单克隆抗体(产品编号MAB一 RT—PCR紫杉醇；阿霉素 0237)和即用型免疫组化超敏试剂盒(产品编号 KIT-9710)均为福州迈新生物技术公司产品。黄酰 多药耐药(multi—drugresistance，MDR)的产生 rodamine