HMGB1基因沉默对阿霉素诱导K562-A02细胞凋亡增敏作用的研究.pdfVIP

生堡查鎏堂盘查!Q堡生§旦筮垫鲞筮!塑g堕垫』坐坐!趔。△!盟咝!鲤!：坠!：望：盟!：墨 ·549· ·论著· HMGBl基因沉默对阿霉素诱导飚62／A02 细胞凋亡增敏作用的研究 谢岷康睿俞燕朱珊贺钰磊许望琼唐道林曾励之 【摘要】 目的探讨高迁移率族蛋白l(HMGBl)基因沉默对白Illl病细胞耐药逆转的作用。方法 将HMGBl基因特异性干扰RNA(HMGBlsiRNA)导入K562／A02细胞中，通过westemblot和RT— PCR方法检测HMGBl基因在转染前后的表达；ws，r8法检测阿霉素(ADM)对转染前后K562／A02细 blot检测线粒体促凋亡蛋白 胞的半数抑制浓度(，c。)；流式细胞术检测凋亡细胞百分率；westem smac／DIABL0的释放；采用caspase活性定量检测试剂盒分析casp鹅e-3的活性。结果①与未经处理 的l(562／A02细胞组相比，转染HMGBlsiRNA的K562／A02细胞组HMcBlmRNA和蛋白水平分别下 降86％和71％；②HMGBl基因沉默使l(562／A02细胞对ADM的药物敏感性增强，其，c鲫值从转染前 亡百分率分别增加27％、32％；③HMGBl基因沉默可促进ADM所致sm鲍／DlABL0从线粒体向胞浆 HMGBl基因沉默能明显增加K562／A02细胞对ADM的敏感 释放，并增加casp船e_3的活性。结论 性，逆转l(562／A02细胞对ADM耐药。 【关键词】基因，HMGBl；细胞系，l(562／A02；细胞凋亡；抗药性，多药；RNA干扰 EIIlIancivee疗跚ofHMGBl genes丑蚰∞佃adri舢ydn-iIIdI删apo呻瞻缸in瞄62／A舵d朋g懈ist- a眦eleukeIIIiaceIb爿旭胁忍+，魁ⅣGRui，yU‰几，ZⅣU鼽帆，肼沌一玩，XU耽ng—q幻ng，m^℃ 眦一妣，翻D“粕i．+D印。疗胱眦矿＆抛如，舭愕弦丑却谢，＆，“剃舶比如叻觑巧妙，Ckn舻地 4JDDD8．现讹 co丌粥po砒馏口眦幻7：翻D厶城i。D加订：c∞Z洗妇，8@b￡，加以．com To thee舱ctof silence objective boxl(HMGBl)gene 【Abstmct】 investigate hi曲mobilitygmup inK562／A02resistance1eukemiacells．Methodsl(562／ 叫a拍amvcin(ADM)一inducedapoptosis d11Jg A02ceUsweretmnsienttransfectedwi山HMCBl．smallinterference thelevels“ RNA(siRNA)vector，and HMGBlgenedi虢rentialexpressionpre一卸dpost．transfectionweremeasuredbvRT．PCR锄dWestemblot． ADMonK562／A02w鹊dete肌inedWST一8 ting．50％inhibitionconcentration(，C岛)of by assay．Cell印一 w硝assessednow releaseofSmac／DIABL0f南mthemitochondriatothe optosis by c”ometry．The cytopl酗m was Westem of was witha ColorimetricKit． assayedby b10tting．Ac“vityCaspase-3assayed C