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低温胁迫对玉米幼苗抗冷性的影响 (东北农业大学生命科学学院　黑龙江　哈尔滨　150030) 摘 要: 文章研究了以25℃为对照, 用5℃的低温24h后胁迫处理玉米幼苗，以研究玉米幼苗的的冷伤害和抗冷性。结果表明, 低温对玉米幼苗造成显著伤害, 表现为叶绿素含量减少, 根系活力降低, 生物膜的通透性增大, 膜脂不饱和脂肪酸含量下降，过氧化物酶活性降低等。冷伤害程度与胁迫温度、胁迫时间密切相关。 关键词: 玉米 冷害 低温胁迫 抗冷性 植物的抗寒性分为抗冷性和抗冻性。许多喜温植物虽然不能抵抗零度以下低温的冰冻伤害, 但对零度以上低温具有一定的忍耐性, 即具有抗冷性。低温在一定程度上破坏细胞膜, 从而影响膜系统维持的生理功能[1]。研究指出, 大部分植物在温度介于0～15℃之间时一系列生理功能被破坏[1，2]。根据对低温的抗性将植物分为两类: 低温敏感型, 如玉米(极限温度5℃)，香蕉(极限温度15℃)；低温非敏感型, 这类植物在0～15℃之间时受冷害的迹象不明显。另一方面, 植物对冷胁迫具有忍受力, 表现出许多从而提高低温忍受力,如可溶性蛋白、糖及游离氨基酸含量升高, 产生较多的胁迫激素ABA等[3]。不同植物, 甚至同一植物低温适应性反应由于原产地不同, 其忍耐低温的能力不同。低温冷害是限制植物分布及农业生产的重要因素, 也是植物引种必须首先考虑的问题[4]。研究表明, 植物的低温伤害机理首先涉及到对膜系统的破坏, 膜脂相变,从而影响膜系统维持的生理功能[5]。 黑龙江属高寒地区,玉米为低温敏感型植物，极限温度为5℃，是我国北方主要栽培作物之一，是改善人民生活，出口外贸的重要物质之一，对发展农业、畜牧业具有十分重要的意义。因此此次研究低温胁迫对玉米的伤害有重大的实际意义。 1．材料与方法 1.1试验材料 本试验所用材料为良玉和松玉两种不同品种的玉米种子(由东北农业大学生命科学学院研究室供)。取玉米种子, 各400粒，用蒸馏水将玉米种子洗净，放入大烧杯室温下在蒸馏水中。先用75%酒精浸泡10s后用蒸馏水洗净残余酒精，再用5%次氯酸钙浸泡20min后用蒸馏水洗净，加蒸馏水没过种子，37℃恒温暗培养进行催芽。12h后，用蒸馏水洗三次，洗去种子表面抑制生长的物质。将大烧杯中水倒净，用干净的湿布塞住烧杯口，加盖培养皿保持水分，37℃恒温暗培养，每隔12h左右用蒸馏水清洗一次种子。种子萌发后，用砂土培养法[6]将玉米种子种植于砂基培养皿中,保证每天光照12h,室温为25±2℃，生长至3叶一心,供低温处理之用。 1.2处理方法 将每个品种的供试材料分为两组,一组于原处继续生长,另一组移至5℃冰柜进行低温胁迫分别处理24h，分别于常温对照和低温处理处取材，测定其生理生化指标。 1.3生理生化指标的测定及方法 1.3.1叶绿素的定量测定 1.3.2植物组织水势测定 1.取干燥洁净的试管6支，用1mol/L的蔗糖母液配制一系列浓度梯度的蔗糖溶液（0.01、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L）各10ml，注入编好号的试管中，塞好塞子，在试管架上排成一列。用阿贝折射仪分别测定[6]7个管内的折光率，记录结果。 2.用打孔器打取叶片，分别放入成有不同浓度蔗糖溶液的青霉素小瓶中，每瓶0.2g，使叶片浸入溶液，溶液大约4ml(青霉素瓶的2/3处)盖紧瓶塞，平衡30min。期间多次摇动，以加速水分平衡。然后用折射仪再次测定个瓶中糖液的折光率，记录结果。 3.通过分析得出植物组织内溶液的浓度，并测量室温。 4.计算将得到的溶液浓度和室温代入公式，计算植物组织水势： 式中 溶液的渗透势（MPa） R 摩尔气体常数 T 绝对温度，即273+t，其中t为摄氏温度 C 溶液的浓度 i 溶液的等渗系数，蔗糖为1。 1.3.3外渗电导率　 称取0.5g的叶片组织（对照组与处理组各0.5g），放入洁净小烧杯中。 将处理组置于冷冻层10分钟后，待室温，用抽气机对两烧杯溶液进行抽气。 3.将叶片置于小烧杯中摇匀，对照组与处理组均各摇10min。 4.用电导仪测其初始电导值S1t、S1ck,。 5.测毕，将小烧杯置于沸水10min以杀死植物组织，取出试管后冷却至室温，在室温下平衡10min后,测量终末电导率S2t、S2ck. 6.计算，将得到的电导率S1、S2代入下面公式中，计算伤害度： 式中 S0为所用蒸馏水电导率，实验测得为3.89 ×100% 式中 Lt为实验组伤害度 Lck为对照组伤害度 1.3.4根系活力测定　 1.标准曲线的制作（已做完） 2.称取两份根尖样品0.5 g分别作为实验组和对照组，放入小烧杯中，加入0.4％ TTC溶液和磷酸