板蓝根药材中氨基酸含量测定研究.pdfVIP

ChineseJournalofNew Drugs2014，23(1) ■■■ _．．．．．．．_、、 整 麓 赣孽簟 謦薏簟赣 任国萍 ，田 璐 。，李 铮 ，傅欣彤 ，郭洪祝 ，陈有根 (1北京市药品检验所，北京 100035；2北京中医药大学中药学院，北京 100102) [摘要] 目的：建立 HPLC法测定板蓝根药材 中10种游离氨基酸和结合氨基酸含量 的方法。方法 ：采 用2，4一二硝基氟苯柱前衍生法及微波水解-柱前衍生法测定板蓝根药材 中10种游离氨基酸和水解氨基酸的 含量，再通过水解氨基酸与游离氨基酸 的差值计算 出结合氨基酸 的含量。色谱柱为 InertsilODS．3柱 (250mmx4．6mm，5 m)；流动相 A为0．03mol·L 乙酸钠缓冲液 (pH6．4，含0．15％三乙胺)，流动相 B为 乙腈，梯度洗脱 ；检测波长为360nm；柱温为27℃；流速为0．6mL·min～。结果：板蓝根药材 中天门冬氨酸 等 10种游离氨基酸和水解氨基酸在一定范围内，浓度与峰面积呈 良好的线性关系，平均 回收率在 85％ ～ 115％范围内，RSD均在 3％以内。板蓝根药材 中游离氨基酸以精氨酸和脯氨酸含量最高，分别大于20和 10 mg·g～；水解氨基酸 以精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、组氨酸含量为高，分别大于36，11，7和 7mg·g～；结合氨基酸 则 以精氨酸、谷氨酸、组氨酸、天冬氨酸含量为高，分别大于 17，6，4．5和4．5mg·g～。结论 ：本方法适合用于 板蓝根药材 中天门冬氨酸等 10种氨基酸的游离氨基酸和结合氨基酸 的含量测定，方法简便、快速、准确 ，可 用于板蓝根 的氨基酸质量控制。 [关键词] 板蓝根药材 ；游离氨基酸；结合氨基酸；微波水解 ；柱前衍生化；含量测定 [中图分类号]R927．2 [文献标志码]A [文章编号]1003—3734(2014)01—0099—06 Determination offreeam inoacidsandconnectedamino acidsin IsatidisRadixbyHPLC REN Guo．ping’，TIAN Lu ，，LIZheng ，FU Xin．tong ，GU0 Hong．zhu ，CHEN You．gen (1BeijingInstituteforDrugControl，Beng100035，China； 2ChinesePharmacyCollege，BeijingUniversityofChineseMedicine，Beng100102，China) [Abstract] Objective：TodevelopanHPLCmethodforthecontentdeterminationoftenaminoacidsinIsa— tidisRadix．M ethods：Thedeterminationwasperformedwithmicrowavehydrolysisandprecolumnderivatizationon anInertsilODS一3column(250mmx4．6mm，5Ixm)，themobilephaseconsistedof0．03mol·L sodium acetate buffersolution(pH6．4)and0．15％ triethylamine(A)andacetonitrile(B)withlineargradientelution，andtheflow ratewas0．6mL·min～．Thecolumntemperaturewasat27℃ ．Thedetectionwavelengthwas360nm．Results： ThelinearitiesofthecalibrationcurvesofrthetenaminoacidsinIsatidisRadixweregood．Andtheaveragerecov- eries(n=6)