复合酸化剂对家禽饮水中细菌的抗菌活性试验.pdfVIP

复合酸化翻对家禽饮水中细菌的 抗菌活性试验 张玲，李丽，蒋月 (辽宁医学院畜牧兽医学院，辽宁锦州 121001) 摘要：以试管二倍稀释法测定自制复合酸化剂对临床分离的2株多重耐药茵的MIC， 采用茵落计数法测定酸化剂对饮水中细菌的杀菌活性。结果显示，酸化剂CAI对大肠杆菌 和沙门茵的MIC都为o．078％，CAII对2株菌的MIC都为o．156％。CA I和CAII在使饮水pH值 降到4．0的添加量下培养8 h时还 h可完全杀灭细菌，而在使pH值降到5．5的添加量下培养24 I对饮 I在培养24h时可完全杀灭病原菌。表明，CA 有细菌存活，在pH值为5．0时，只有CA 水中病原菌有很好的抗茵活性，可用于家禽饮水的消毒。 关键词：酸化剂；多重耐药；抗茵活性；饮水 本试验从鸡场发病鸡群中分离多重耐药菌株， 并通过镜检和生化反应对所分离细菌进行鉴定。 探讨自行研制的复合酸化剂对多重耐药菌株的抗 1．5药敏试验 菌活性，以期开发出绿色、高效的家禽饮水酸化剂。 按照Kirby—Bauer法进行乜1，每次试验前用标 1材料与方法 准菌株ATCC25922进行质控，药敏试验结果参照 1．1样本及质控菌株 CLSI(2007)b1判定标准进行。 锦州市周边规模化鸡场分离鉴定的大肠杆菌 1．6酸化剂对细菌MIC的测定 和沙门菌。质控菌株为大肠杆菌ATCC25922，购以分离的多重耐药数最高的大肠杆菌和沙门 自中国兽医药品监察所。 菌为指示菌，采用试管二倍稀释法测定复合酸化 1．2酸化剂 剂对其抑制作用，酸化剂终浓度分别为10％、5％、 I和CAlI是利用均匀设计方 复合酸化剂CA 法自行研制的酸化剂。主要由磷酸、甲酸、丙酸、 o．039％和o．02％。相同过程重复3次，取中位数。 乳酸、延胡索酸、柠檬酸等组成。 1．7酸化剂对家禽饮水的杀茵作用 1．3培养基及药敏纸片 参照Chaveerachnl的方法评价酸化剂在家禽 试验所用的各种培养基及葡萄糖、麦芽糖、乳糖、 饮水中的杀菌作用。鸡饲料烘干至恒重并研碎， 蔗糖、甘露醇、吲哚、H：s、MR和VP9种微量生化反 称取6．25 mL家禽饮水的三角烧 g放人装有250 应管均购自杭州天和微生物试剂有限公司，试验用 瓶中，121℃灭菌15min。向制备好并已灭过菌 14种药敏纸片包括氨苄西林、头孢唑林、链霉素、庆 的饲料饮水混合物中分别加入各酸化剂，使其pH 大霉素、阿米卡星、安普霉素、多西环素、氯霉素、氟苯 值分别降到5．5、5．0、4．0，涡旋混匀，37℃水浴过 尼考、环丙沙星、恩诺沙星、磷霉素、复方新诺明和 夜。然后加入制备好的菌液，漩涡混匀，菌终浓度 多黏菌素B购自北京天坛药物生物技术开发公司。 为1×105cfu／mL。将制备好的混合物放37。C水浴 1．4细菌的分离鉴定 培养，分别在o．5、1、4,8、24h时对培养物中细菌进 根据文献“1方法对样品进行细菌的分离、纯化， 行计数。对培养物按10倍稀释法进行稀释，稀释后 收稿日期：2012-11-15 选取适宜的稀释度，吸取100此稀释液到琼脂平板