3.24前列腺癌骨转移TIMP-2%2fMMP-2变化及柚皮苷对其表达影响体外研究.pdf

前列腺癌骨转移TTMP一2／M肝一2变化及 柚皮苷对其表达影响的体外研究 硕士研究生： 陈明霞 导 师：陶瑜副教授 中山大学基础医学院病理学教研室 摘要 【背景】前列腺癌在北美国家是最常见男性恶性肿瘤。在美国，前列腺 癌发病率占第一位，死亡率仅次于肺癌。我国前列腺癌发病率虽远低于西方国 家，但近来亦呈显著增长趋势。前列腺癌最易发生骨转移，美国死于前列腺癌 的患者中80％～100％合并骨转移。可见，骨转移是前列腺癌重要的临床病理特 征和主要的致死原因。因此，关于前列腺癌骨转移的发生机制和治疗成为最近 研究的热点。 研究表明，TIMPs和MMPs比例失调可引起过量的细胞外基质降解，导 致肿瘤细胞的侵袭、转移。在恶性肿瘤间质中和瘤细胞TIMPs舢MPs比率降低 其预后较差。然而，在前列腺癌骨转移的过程中，TIMP一2／MMP．2比率变化与 前列腺癌骨转移预后的关系仍不是十分明确。 另外，前列腺癌骨转移的治疗一宜以来依靠传统的治疗模式，即主要针对 肿瘤细胞的治疗，然而药物的抗恶性肿瘤细胞作用常常受到肿瘤所转移部位微 环境的影响。因为前列腺癌细胞转移至骨以后，宿主骨组织能够产生多种生长 因子(grow 癌细胞产生的生长因子又促进了成骨细胞的生长。这些生长因子和细胞素大大 削弱了抗癌药物的诱导凋亡作用。基于此，有些学者提出：通过促进或阻断肿 瘤细胞及宿主正常组织释放的生长因子和细胞素的分泌可以抑制肿瘤细胞在转 移部位的生长。但是由于参与此过程的细胞因子种类繁多难以调控，以及药物 的副作用等病人的生存质量并没有改善。 我们知道，在前列腺癌骨转移早期，前列腺癌细胞可以分泌MMP．2引起 骨质溶解，以便为以后的成骨提供了必要的生长空间、营养物质和钙离子。因 此，若药物能在前列腺癌骨转移早期有效地抑制前列腺癌细胞的生长和分化， 防治骨质的破坏，将大大减低治疗的难度。柚皮苷既能够抑制骨质的破坏，又 具有抗肿瘤作用。为此，我们通过前列腺癌细胞与骨片共培养，观察前列腺癌 骨转移进展过程中TIMP-2／MMP．2比率变化以及在前列腺癌骨转移早期柚皮苷 对MMP一2／TIMP．2表达的影响。 第一章 体外前列腺癌骨转移TI肝一2／删P一2表达比率变化 【目的】探讨前列腺癌骨转移进展过程中TIMP．2／MMP．2比率变化。 【方法】前列腺癌细胞株与胎儿颅骨骨片共培养，收集上清液检测钙离子浓度， 通过RT-PCR方法观察随着时间变化，TIMP．2／MMP．2表达比值的变化。 【结果】骨片与前列腺癌细胞株PC．3M一起培养的上清液中钙离子浓度随时 问延长时间而逐渐升高，而骨片单独培养钙离子浓度是逐渐下降的。在mRNA 水平上，TIMP-2／MMP．2比率亦逐渐下降。 【结论l随着前列腺癌骨转移的进展，TIMP．2／MMP．2比率下降，癌细胞对骨 组织的破坏作用增强。TIMP．2／MMP．2比率可以成为判断前列腺癌骨转移的预 后指标。 第二章体外柚皮苷对前列腺癌细胞TI-tP-2、I删[P-2表达的影响 l目的】观察前列腺癌骨转移早期柚皮苷对MMP．2／TIMP一2表达的影响。 【方法l柚皮苷加入共培养的癌细胞与骨片中，通过检测上清液中钙离子的浓 1l 分析及细胞爬片免疫组化来观察柚皮苷对TIMP-2、MMP-2表达影响。 软件分析结果：柚皮苷处理组颅骨平均骨小梁的厚度数值较对照组具有统计学 MMP．2的表达没有影响fP0．05)。前列腺癌细胞株PC．3M免疫组化结果亦表明： 达具有统计学意义(P0．001)。 【结论】柚皮苷使TIMP．2的表达增强，而对MMP．2的表达没有影响，因此， 柚皮苷能够通过促进TIMP．2的表达而间接抑制了前列腺癌细胞对骨质的破坏。 这可能为前列腺癌骨转移的治疗提供新的理论依据。 关键词：前列腺癌，肿瘤转移，TIMP一2／删P一2，柚皮苷 Ul The ofTIMP-2／MMP-2 in RatioBone Change