水稻产量QTL位点LRK基因簇的基因功能与研究及下游互作蛋白的筛选.pdfVIP

复旦大学博士论文 水稻产量Qrt,位点LRK基因簇的基因功能研究及其下游互作蛋白的筛选 摘 要 有效分蘖数、每穗粒数和千粒重是构成水稻产量的三要素。这些因素的变异 traitloci， 呈连续分布，呈现数量遗传的特性。这些性状受多个位点(quantitative QTLs)的影响，并且它们的表达受环境和遗传背景的修饰。由于其复杂性，只 有少部分调控这些性状的基因被分离和证实。先前，我们通过图位克隆的方法从 sativa 以东乡野生稻(OryzarufipogonGri纯)为供体与以桂朝2号(Oryza L．ssp． 试验证明这个QTL位点促进水稻谷粒子增加从而对产量的贡献率达到16％．基 因结构分析表明这个QTL位点由LRKI-LRK8 0eucine-dehrepeatr∞eptorolike kinase,幽，八个编码富含亮氨酸重复序列型类受体激酶新基因所组成的基因 簇。有意思的是东乡野生稻的基因簇中包含LRKl基因，而贵朝2号基因簇中这 个基因缺失。所以我们选用东乡野生稻的LRKl基因进行研究，数据显示LRKI 在根、茎、叶、幼穗中有都表达；亚细胞定位实验表明LRKl蛋白定位于质膜上． 将LRKI基因导入缺失LRKl基因的籼稻9311(咖sativav戤 L．subsp．indica 9311)中过表达，结果发现过表达LRKI基因降低了株高，促进了细胞分裂和植 株生长，提高了水稻有效分蘖数、每穗粒数、二次支梗数，因此我们推测LRKl 基因与植株分枝发育有关。最终的统计结果显示LRKI基因提高了水稻的单株产 量达58％。水稻因为基因组比较小(390胁)，目前基因组测序已经完成，而成为 单子叶植物的模式植物。对LRKl基因功能的分析不仅有利于对水稻产量形成机 制的理解，同时也促进对其他作物的产量形成的分子机制的认识． 一 为了验证同一基因簇中其他同源基因是否具有相似的功能，我们选择了 LRK6和LRK7构建于不同的表达载体进行过表达研究，研究结果表明LRK6和 效分蘖数的贡献分别为38．1％，27．86％。单株粒数分别增加了49％，36．36％。 LRKs在植物生长发育和抗性反应中起着广泛的调节作用。为了探索LRKl 基因在细胞内的互作蛋白，我们将LRKl基因的胞内域构建成诱饵质粒采用酵母 双杂的方法筛选籼稻9311的eDNA文库，获得了与LRKl互作的翻译延伸因子 elF．1A(translation factor)蛋白，这种相互作用在酵母中得到了证实， elongation 其体内试验还在进行中。我们初步推测LRKl基因通过促进蛋白质翻译发挥其生 理功能。 关键词：水稻，产量，富亮氨酸重复受体蛋白激酶基因(职K)，细胞分裂，分 枝发育，酵母双杂，elF．IA III 复旦大学博士论文 水稻产量QTL位点从K基因簇的基因功能研究及其下游互作蛋白的筛选 Abstract In of sativa number perpanicle,andgrain rice(OryzaL．)，the panicles，spikelets are of characteristicsarecontrolled weightimportantcomponentsgrainyield．These