小鼠脐血移植模型的建立及角质细胞生长因子在移植后免疫重建中作用机制与研究.pdfVIP

小鼠脐m移植模型的建谚及角质细胞生长【六1子在移植后免疫蕈建中作用机制研究 中文摘要 小鼠脐血移植模型的建立及角质细胞生长因子在移植后 ． 免疫重建中作用机制研究 中文摘要 一、小鼠脐带血造血干细胞移植模型的建立 目的： 探讨小鼠脐带血收集方法、建立可长期生存的小鼠异基因脐带血造血干 细胞移植模型。 方法： 分开。取孕E19．5d小鼠，无菌条件下取出胎鼠，置于0．4％柠檬酸钠的RPMI．1640 完全培养基内，先后剪丌胎鼠颈动脉和心脏，充分释放外周血。将32只8．10周龄 X射线全身 SPF级BALB／c小鼠随机分为4组，每组8只，BALB／c小鼠接受8．0Gy 照射。分别输注0．4ml 注1×109个血小板。 结果：成年C57BL／6小鼠予促排卵处理单次妊娠可获得6．11只胎鼠／胎，平均8 xl 差别具有统计学意义(户0．001)。同基因脐血移植输注106个脐血TNCs小鼠给予 长期生存小鼠无明显GVHD表现。 中文摘要 小鼠脐Jfn移植模型的建口及角质细胞生长闪子在移植后免疫蕈建中作用机制研究 结论：采用抗凝培养基可以明显增加单个胎鼠平均采集脐带血有核细胞数，在小 鼠脐血移植后予血小板输注成功建立了能重建造血并长期生存的异基因小鼠脐血移 植模型。 二、白血病小鼠脐带血造血干细胞移植模型的建立 目的：建立C57BL／6一BALB／c白血病小鼠异基因脐带血造血干细胞移植模型。 TBI对照、同基因小鼠脐带血造血干细胞移植对照、异基因小鼠脐带血造血干细胞移 结果：无TBI处理对照组小鼠接种后14天内全部死于白血病。单纯TBI处理组小 鼠处理后14天内全部死于造血衰竭所致全血细胞减少。同基因对照小鼠20天内全部死 于白血病，移植前4天接种EL9611白血病细胞后予TBI预处理可成功制各白血病微小 结论：在成功建立血小板输注支持的小鼠异基因脐带血造血干细胞移植模型的基 础上，本部分采用脐血移植前4天尾静脉接种EL961l白血病细胞建立白血病脐血造血 干细胞移植模型。异基因UCBT具有明显的移植物抗白血病作用 三、KGF对小鼠脐带血造血干细胞移植后免疫重建和白血病复发的影响 目的： 探讨研究KGF输注对移植后免疫重建和白血病复发的影响。 方法： 法检测T细胞受体13链谱型；流式细胞仪检测淋系重建；外周血涂片瑞氏染色检测白 血病复发。免疫重建实验共设立2组，每组12只小鼠。PBS免疫重建对照组：不接 PBS连用7天，TBI处理后输注 种白血病，小鼠自TBI前．3d起每日皮下注射0．2ml 2×l 验共设立4组，每组10．12只小鼠。对照1组：接种白血病，无TBI处理；对照2组： Ⅱ 小鼠脐I『fL移植模型的建、)=及角质细胞生长I大l了和移植后免疫重建中作用机制研究 中文摘要 白血病，小鼠自TBI前．3d起每R皮下注射0．2mlPBS连用7天，TBI处理后输注2x106 个脐带血TNCs，移植后+8d予输血小板支持；KGF白血病实验组：接种白血病，小 鼠自TBI前．3d起每R皮下注射重组人KGF 个脐带血TNCs，移植后+8d予输血小板支持。 结果：+35天PBS免疫重建对照组小鼠脾细胞总数、T、NK和B细胞数分别为 PBS白血病对照组白血病小鼠脐带血移植后28天后陆续出现白血病复发，4／12只生 白血病小鼠生存时间比较差别有统计学意义(f=4．996，户=0．0254)。 结论：异基因脐带血造血干细胞移植TBI预处理前KGF输注可以促进胸腺上皮 功能恢复，增强胸腺输出功能，促进外周T淋系免疫重建，并且增强的T细胞免疫 重建可降低异基因脐带血移植后白血病复发。 关键词：异基因造血干细胞移植；脐带血造血干细胞移植；角质细胞生长因子； 移植物抗宿主病；移植物抗白血病；免疫重建；小鼠模型；体内