腺病毒介导的野生型p53基因逆转乳腺癌耐药细胞株MCF-7-A耐药性的研究.pdfVIP

-实验研究- 腺病毒介导的野生型 p53基因逆转乳腺癌 耐药细胞株MCF．7／A耐药性的研究 张玉宝 张玉和李兵张岂凡 【摘要】 目的探讨野生型p53基因对乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A耐药性的逆转作用及其 机制。方法选用含野生型p53基因的重组腺病毒载体，转染乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A，绘制细 胞生长曲线，利用流式细胞计数仪检测细胞周期分布及凋亡分析、TUNEL法检测细胞凋亡的发生， 并采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot印迹转移检测053基因的表达情况。结果 野生型p53基因转染MCF-7／A后的24、48 h均检测到p53基因的表达，并显著抑制MCF-7／A细胞 的增殖；细胞周期发生改变，转染后的MCF-7／A的Go—G，期DNA百分含量(76．22％)明显高于对 照组(43．64％，P0．05)，凋亡率(10．76％)与对照组(1．48％)之间差异有统计学意义(P 0．05)。结论重组腺病毒介导的野生型p53基因对乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A的耐药性有明显 的逆转作用，其机制可能是引起明显的G。期阻滞并诱导细胞凋亡。 【关键词】乳腺癌；腺病毒；053基因；耐药性 Reverseof effectadenovi吣-mediatedrests“L瞅ofbreastcancercelllineMCF-7／A Wt-圃ondrug Tumour Z删vG地一bao‘，勰4ⅣG地一k，LIBing，eta1．。DepartmentofSurgery，孤AffiliatedHospital， HarbinMedwal University．Harbin150040．China To thereverseeffectof on resistanceofbreast 【Abstract】Objective Wt—p53 explore genedrug cancercelllineMCF-7／Aandits mechanism。MethodsWt．n53 wastranfectedintoMCF． possible gene 7／Acells adenovirus．Thecell curveWas the distributionand throughrebuilding growth drawn．andcycle werecheckedFCM．，Ille ofMCF-7／Acellswasexamined11UNEL．ne apoptosis by apoptosis by expres． sionof mRNAand inMCF一／Acells PT．PCRandWesternblot Wasdetected respec． Wt一053 protein by InthetransfectionofMCF-7／A obvious thee】【． tively．Results group cells．thereWas pml如ration。and of mRNAand Wasdetected24and48h before indica- pression053 protein later．Aneuploidpeak Glstage tedDNAdestructionandcell DNAcontentintransfectionin apoptosis．r