利用分子标记进行草莓品种鉴定的研究.pdfVIP

沈髑1农业^学破lj学位论史 摘 要 。iM中混乱是困扰草莓科研和生产的大问题。分子标记技术的出现为这 一问题的解决展现出光明前景。本课题旨在通过对几种分子标记的系统研 究．为建立可用于鉴定革莓品种的稳定可靠的分子标记体系奠定基础。主要 研究结果如下： 分析。 10倍后的DNA模板，2 p．L10xPCR反应缓冲液．1．6p．L uL 1．20p．L引物和0．2Taq see，40℃2min，72℃3 min，45个循环：72℃延伸7min。在不同型号PCR 仪上的扩增结果表明浚RAPD体系重复性良好。 分。来自不同地点的3份全明星材料总体带型基本一致，新明星与全明星之 问只在一些弱带上有差异，不易区分。卡玛罗莎和章子一号．红脸颊和同本 99号两对品种带型基本一致，只有一些弱带上有差异。结合形态学调查的结 果，初步认为卡玛罗莎和章子一号，红脸颊和闩本99号两对品种可能是同 物异名的品种。3份丰香试材在叶片和果实形态上存在一定的差异，而引物 可能是混杂的品种，属同名异物。 选}l{4个用于草莓品种豁定。 4个炎’型。 ISSR；SCAR 关键词：草莓；分子标记：品种鉴定：RAPD 前 苦 只U 昂 草莓(Ex d舢n绷Duch．)因其植株矮小，适于在保护地进行集约化 栽培及生产周期短，收益快等特点，近年来在我国得到迅速发展。在市场 需求的推动下，业内人士积极开展品种选育和国外品种引进工作，从而使 生产上品种更新换代的速度大大加快。这～方面有利于生产水平的提高， 另一方面由于新老品种数量增加，品种引进和销售渠道混乱以及品种命名 的增多，给品种资源的搜集、整理、保存和利用造成很大困难(赵长增等， 2003)。这在客观上对草莓栽培品种的准确鉴定提出了更高的要求。过去主 要以形态标记进行品种鉴定工作，这需要有经验的科学家在特定的时期进 行较长时间的观测分析，而且形态特征本身是遗传物质表达的结果，在此 过程中易受环境条件的影响而改变，另外对于亲缘关系较近的品种可资利 用的形态学标记不多，这些因素导致很多鉴定工作难以给出确切的结论。 分子标记技术的出现给这～问题的解决展现出光明的前景。分子标记 通过直接检测遗传物质来鉴定品种，可以不受气候，地理等环境条件的影 响，是一种比较理想的遗传标记，是对传统遗传标记的有力补充。 一、分子标记 遗传标记是鉴别基因组中基因位点的手段，是基因型特殊的易于识别 的表现形式(贾继增，1996)。品种鉴定及其它遗传研究都离不开遗传标记。 分子标记是基于生物大分子，尤其是DNA的多态性而发展起来的遗传标记 (张开春等，1999)。广义的分子标记包括蛋白质标记(如等位酶分析和蛋 conformmion (single—stranded 子标记是狭义的分子标记，不包括蛋白质标记和直接的DNA序列分析(以 下同)。DNA是遗传物质，稳定且拥有丰富的变异。组成DNA分子的碱基 虽然只有A、T、c、G四种，碱基配对的方式也只有A．T和c—G两种，但 碱基可以任何顺序排列，因而与早期的遗传标记(形态标记、生化标记和细 胞学标记)相比，基于DNA的分子标记具有以下优越性：直接以DNA的形 式表现，能稳定遗传．不受组织类别、发育时期和环境条件的影响；遍及 整个基因组，数量众多；多念性高：许多标记在非编码区，表现选择“中 沈阳敏业大学硕上学位论文 喻节等，2001)。 随着技术的逐步成熟和新策略的大量涌现，分子标记的种类越来越丰 富，人们按照不同的标准对其进行了分类。根据遗传特性可分为显性遗传 的分子标记和共显性遗传的分子标记。根据所使用的分子生物学技术和引 物的不同可分为以下三类(王倩与王斌．，2000；吴俊等，2002)： (一)基于Southern杂交技术的分子标记 射自显影(或非同位素)等技术检测DNA的多态性。限制性片段长度多态性 (restriction