离子对色谱法的流动相.pdfVIP

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2017-08-27 发布于云南
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色谱讲堂（二十）离子对色谱法的流动相广州太玮生物科技有限公司市场·技术部 Marketing@ 02062807938 (2013年7月) 色谱讲堂（二十）前言离子对色谱法：是将与待测组分离子带相反电荷的离子加入到流动相中，与待测组分离子形成弱极性离子对，所形成的离子对化合物在流动相中不易离解，形成中性分子，增强其在非极性固定相中的保留，从而改善分离效果。显著增强保留改善峰形色谱讲堂（二十）适用化合物类型适用离子对色谱法的条件： 1、在反相HPLC色谱柱不保留，或保留很差（保留因子k＜2 ） 2、化合物带有强离子官能团，如磺酸基、羧基、胺基、铵基等。 3、化合物在反相体系流动相有足够的溶解度。色谱讲堂（二十）常用离子对试剂和适用化合物离子对试剂适用化合物磺酸钠类：己烷磺酸钠、庚带胺基、铵基大极性化合物烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等季铵类：四丁基氢氧化铵、磺酸基、四丁基溴化铵等羧酸基大极性化合物色谱讲堂（二十）开发离子对试剂色谱法两个关键要素： 1、离子对试剂浓度与样品浓度比例； 2、流动相的pH值和缓冲盐的浓度。色谱讲堂（二十）离子对试剂浓度与样品浓度比例实验条件和方法：仪器：Agilent 1200 四元梯度系统色谱柱：JADE-PAK ODS 3um 50mm ×4.6mm色谱柱流动相：甲醇：10mM己烷磺酸钠（pH 2.8缓冲盐）（35：65 ）指标物：苯胺检测波长：254nm 流速：1ml/min 色谱讲堂（二十）试验结果1 样品浓度：0.12mg/ml 1.25mM 色谱讲堂（二十）试验结果2 样品浓度：0.23mg 2.5mM 色谱讲堂（二十）试验结果3 样品浓度：0.93mg/ml 10mM 色谱讲堂（二十）试验结果4 样品浓度：1.86mg/ml 20mM