加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌HT－29细胞的抑制效应及其机制研究.pdfVIP

２０ １４ 年 １１ 月第 ３１ 卷第 ６ 期 广州 中医药大学学报 Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０ １４ ，Ｖｏｌ． ３１，Ｎｏ． ６ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 979 加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞 的抑制效应及其机制研究 王伟 ， 杨海淦 ， 罗立杰， 梁宇鹏 ， 郑燕生 ， 刁德 昌 （广州 中医药大学第二附属医院， 广东广州 ５１０ １２０ ） 摘要 ： 【 目的】 观察加味扶正抑瘤汤含 药血清对结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞株增殖及 细胞凋亡抑制基 因 Ｂｃｌ－２、 促凋亡基 因 ｐ５３ 表达 的影响。 【方法】 选取结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞株 ， 随机分不 同浓度含 药血清组及 空白血清组 ， 采用四甲基偶 氮唑盐 （ＭＴＴ ） 法、 实时无标记动 态细胞分析 （ＲＴＣＡ ） 法、 逆转录—聚合酶链反应 （ＲＴ－ＰＣＲ） 法检测细胞增殖以及 Ｂｃｌ－２、 ｐ５３ ｍＲＮＡ 表达情 况 。 【结果 】 加味扶 正抑瘤汤含 药血清对结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞株增殖具有抑制作 用 （Ｐ＜０．０５ ）， 且呈浓度与时间的依赖关 系； 体积分数 １２％、 １５％含 药血清作用 ４８ ｈ 可显著降低 ＨＴ－２９ 细胞株 Ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ 表达 ， 升 高 ｐ５３ ｍＲＮＡ 表达 ， 与空白血清组 比较 ， 差异均有统计学意义 （Ｐ＜０．０５ ）。 【结论】 加味扶正抑瘤汤对结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞增殖具有明显的抑制作用， 其机制可能 与下调 Ｂｃｌ－２ 和上调 ｐ５３ 的表达相关。 关键词 ： 加味扶正抑瘤汤／ 药理学； 结肠癌／ 中药疗法； 细胞增殖 ； 细胞培养 ； 基 因表达调控 中图分类号 ： Ｒ２８５．５ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １００７－３２１３ （２０ １４ ） ０６－０９７９－０５ ＤOI ： １０． １３３５９／ ｊ ． ｃｎｋｉ． ｇｚｘｂｔｃｍ． ２０ １４． ０６． ０２８ 加味扶正抑瘤汤 （广东省 中医院经验方 ） 由生 国 伯腾公 司 ） ； ＳｔｅｐＯｎｅ ＴＭ 实时荧光定量 ＰＣＲ 仪 黄芪、 西洋参 、 龟板 、 全蝎、 白花蛇舌草、 王不 留 （美 国 ＡＢＩ 公 司 ） ； ＲＴＣＡ ＤＰ ＲＴＣＡ 多功能实时无 行 、 白术 、 茯苓 、 生甘草 、 牡丹皮 、 槲寄生组成 ， 标记细胞分析仪 （美 国 ＡＣＥＡ 公 司 ） ； ＸＬ９０ 超速 具有调节免疫和抑制肿瘤生长的作用 。 临床上常用 低温离心机 （美 国 Ｂｅｃｋｍａｎ 公司）。 于治疗 胃癌、 肠癌、 前列腺癌等恶性肿瘤 。 为探讨 １． ３ 实验动物 ＳＤ 大 鼠 ４０ 只 ， 雌雄各半 ， ＳＰＦ 加味扶正抑瘤汤含药血清对结肠癌的抑制效应及其 级 ， 体质量为 （２３５ ± １５ ）ｇ ， 由广东省医学实验动 可能机制 ， 本研究选取结肠癌 ＨＴ－２９ 细胞株 ， 观 物 中心提供 ， 合格证 号 ： ４４００７２００００００９０ ， 雌性 察其对细胞增殖 以及 Ｂｃｌ－２、 ｐ５３ ｍＲＮＡ 表达 的影 号 ： 雄性号 ：。 响 ， 现报道如下 。 １． ４ 含药血清 的制备 取 １０ 剂加 味扶正抑瘤汤 水煎剂 （医院药房煎制 ）， 生药量 １ ８００ ｇ ， 浓缩至 １ 材料与仪器