麻疯树核糖体失活蛋白curcin基因的原核表达及其抗真菌活性的研究.pdfVIP

200 9年11月 四川大学学报( 自然科学版) Nov ．2009 第46卷第6期 Jour na l of Si c hu an Uni ve r s i t y (Nat ur al Sc i e nce Edi t i o n) V01．46 No ．6 doi ：103969 ／ ．i s sn ．0490—6756 ．2009 ．06 ．04 1 麻 疯 树 核 糖 体 失 活 蛋 白 cur ci n基 因 的 原 核 表达及其抗真菌活性的研究 邵彩霞，秦小波，蔡 峰，辜小平，闫毅武 ，王成世， 徐 ·莺，陈 放 ( 四川大学生命科学学院，成都6 10064) 摘 要 ：通过PCR方法 ，将麻疯树核糖体失活蛋白cur ci n的开放阅读框片段从麻疯树总 DNA中扩增出来．并将该克隆基因片段连接到原核表达栽体PQE一30 中，成功构建了重组质 粒pQE- C，转化大肠杆茵M15茵株．经I PTG诱导后，cur ci n重组蛋 白在大肠杆菌中成功表 达 ．然后通过纯化原核表达产物，得到纯化的cur c i n重组蛋 白，并 以纸片法进行体外抗茵活性 检测 ，发现其具有较强抗真茵活性 ． 关键词 ：原核表达 ；核糖体失活蛋白；抗真菌活性 ；麻疯树 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：0490—6756(2 009) 06—1793—05 Pr oka r yot i c exp r es se d r i bosome- i na ct i vat i ng pr ot ei n( cur ci n) wi t h ant i ·fungal a ct i vi t y f r om dat r opha cur c as L． SHAOCa i —Xi a ，QIN Xi at r Bo ，CAI Feng，GUXi a o—Pi ng，YAN Yi —Wu， WANGChe ng—Shi ，XU Yi ng ，CHENFan g ( Co l l e ge of Li f e Sc i e nce s ，Si ehu an Uni ver si t y，Ch engdu 6100 64 ，Chi na ) Abst r act ：The ope n r eadi ng f r ame( ORF) of cur c i n wa s ampl i f i ed f r om t ot al DNAof Ja t r oph a cur cas by PCR met hod ．The cl oned gene f r agment s we r e l i ga t e d i nt o a pr okaryot i c expr es s i on vect or pQE一3 0 an d t he r ecombi nat i on pl as mi d pQE- C was const r uct ed ．Then t he pQE—C was t r ans f or med i nt o E．col i M15 ， an d t he r ecombi nat i on cur c i n was expr es s ed i n M15 und er I PTG i ndu ct i on ．The pur i f i ed r ecombi nat i on cur ci n was obt ai ned an d i t s a nt i b ac t e r i al ac t i v i t y was t es t ed i n vi t r o b