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假病毒的最新应用研究进展.ppt
假病毒的最新应用研究进展 杨星钰 研究背景 有些病毒,如SARS—CoV,埃博拉病毒,H5N1等,传染性强、致病性高,给研究带来极大困难和危险。由于假病毒安全性好,并具有广泛的宿主和非细胞周期依赖性高效转染静止细胞等优点,因此,假病毒技术将会是一种非常安全有效的研究手段。 假病毒特性 整合了其他病毒的囊膜蛋白,而且核酸分子上编码囊膜蛋白的基因被修饰掉,所以丧失了病毒的自我复制能力,只能进行“一个细胞周期”的侵染,生物安全性比较强 。 具有广泛的宿主范围和更高的转染效率,比其原病毒更容易浓缩,能抵抗血清补体的灭活作用,有非细胞周期依赖的整合特性,并可高效地转染静止细胞。 假病毒的应用 1、研究病毒与宿主细胞问的相互作用 (1)研究病毒的细胞嗜性,确定病毒的易感细胞; 利用携带SARS病毒的s膜蛋白的MuLV假病毒,确定了SARS病毒的易感细胞。 (2)研究病毒的进入过程,寻找特异受体; 构建巨噬细胞的eDNA/VSV—G感染性假病毒文库,感染马传染性贫血病毒(EIAV)的非易感细胞NIH3T3细胞,随后用具有新霉素抗性的EIAVuk报告病毒去感染上述细胞,通过新霉素抗性筛选出7株阳性克隆,对这7株克隆的细胞DNA分析后发现了EIAV的特异性受体ELR一1。 假病毒的应用 2、中和抗体及中和抗原表位研究 与传统的中和抗体检测技术相比,用假病毒进行中和抗体检测,具有安全、快速、标准化、高通量和高度敏感性等优点。 目前在HIV、HCV、SARS—COV和高致病性禽流感的中和抗体检测方面开展了系列研究。 假病毒的应用 3、应用于基因治疗 (1)假病毒应用于恶性肿瘤的基因治疗; (2)假病毒用于造血干细胞和其他血细胞介导的 基因治疗; (3)假型病毒应用于遗传疾病的基因治疗; (4)其他应用。 * * * * *
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