第六节临床生物化学实验方法的选择与评价.pptVIP

临床生物化学实验室基本知识 广医一附院检验科 实验用纯水 天然水含有许多杂质点 悬浮物 泥沙、藻类、植物遗体等 胶体物质 粘土胶粒、溶胶等 溶解物质 Na+/K+/Cl+/Ca++ HCO3-/NH3 有机物 微生物 天然水的处理 天然水 ↓简单的物理、化学方法处理， ↓除去悬浮物和部分无机盐。 自来水 ↓蒸馏、电渗析等处理，除去杂质。 实验用纯水 纯水的制备方法 蒸馏法：经典方法。理论上为“纯水”，但难除去挥发性物质和微滴。 离子交换法：除去水中的阴、阳离子杂质。 电渗透析法：除去水中的阴、阳离子杂质。 炭吸附法：除去水中的有机物。 超滤膜法：除去水中的悬浮物。 混合纯水系统 纯水的纯度检查指标 电导率或电阻率 用电导仪或欧姆表测定； 电导单位为西门子（S），电导是电阻的倒数； 1S=1Ω-1 每cm长的电导为电导率（S.CM-1） 可溶性硅检验 细菌菌落计数 美国NCCLS等级纯水的规定 级别 Ⅰ级 Ⅱ级 Ⅲ级 微生物含量（最大菌落/ml） 10 103 未定 pH 未定 未定 5.0-8.0 电阻率 （ MΩ/cm,25℃ ） 10 2.0 1.0 硅（mgSiO2,最大量） 0.05 0.1 1.0 微粒 （μm微孔膜滤过） 0.2 未定 未定 有机物 活性炭过滤 未定 未定 NCCLS、CAP规定的等级纯水用途 级别 用途 NCCLS Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、荧光、酶、 高灵敏度层析、电泳、参比液、缓冲液 Ⅱ 一般实验检验、玻璃器皿冲洗 Ⅲ 玻璃器皿洗涤、要求不高的定性试验 CAP Ⅰ 原子吸收、火焰光度、电解质、血气、酶、 无机元素、参比液、缓冲液 Ⅱ 一般实验检验、血液学、血清学、微生物学 Ⅲ 普通定性、尿液检验、组织切片、寄生虫、 器皿洗涤 影响实验用纯水质量的环节 制备 贮存 运输 使用 所有环节均应避免污染。 临床生物化学实验方法的选择与评价 教学内容与教学安排 实验方法选择与评价的流程 实验方法的选择 实验方法的评价 实验方法选择与评价的流程 ↑→→→ 方法选择 ↑ ↓↑ ↑ 方法评价←←←方法发展 ↑ ↓ ↑ ↑ 常规分析前的准备 预防措施 ↑ ↓ ↑ ↑ 常规分析后的补充 ↑ ↑ ↓ ↑ 诊断性能←←常规分析→→→统计质控→结果报告 临床生化实验方法的选择 教学内容与教学要求 实验方法选择的目的 实验方法的分级 标准品的分级 实验方法选择的原则 实验方法选择步骤 实验方法选择的目的 结合自身的条件，确定合适的、某项目的检测方法； 保证拟使用的方法在正式使用前，已了解方法分析性能及可能引入的误差。 实验方法的分级 决定性方法（definitive method)： 准确度最高，系统误差最小，用于评价参考方法和一级标准品。 参考方法（reference method）： 准确度与精密度已充分证实的分析方法，干扰，系统误差小，用于鉴定常规方法和二级标准品。 常规方法（routine method）： 性能指标符合临床需要，有适当分析范围，经济实用，用于临床常规标本的检测。 临床生化部分项目的三级方法 决定性方法 参考方法 常规方法 钾 ID-MS 火焰光度法 离子选择电极 钠 中子活化法 火焰光度法 离子选择电极 总蛋白 —— 凯氏定氮法 双缩脲法 肌