GDNF基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血的实验研究.pdf

一 346 一 重庆医科大学学报2010年第 35卷第3期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2010．VOI．35NO．3) 黧濑 文章编号：o253—3626(2010)03—0346—04 GDNF基因修饰的神经干细胞移植治疗大鼠局灶性脑缺血的 实验研究 杜 杰 ·，高小青2，陈 波 ，杨朝鲜z，先雄斌z，袁琼兰3 (1．四川省泸州市泸州医学院教务处，泸州 646000；2．泸州医学院神经生物学研究室及解剖学教研室，泸州 646000；3．同济 大学解剖学教研室，上海 200029) 【摘 要】目的：观察转染胶质细胞源性神经营养因子(Glialcellderivedneurotrophicfactor，GDNF)基因的神经干细胞(Neural stemcells，NSCs)移植在脑缺血大鼠脑组织的分布，探讨其神经保护作用。方法：体外培养新生大鼠NSCs，采用改良的线栓法制 作脑缺血再灌注模型，3d后用脑立体定位仪分别经脑室移植生理盐水、NSCs和GDNF／NSCs。各组移植前及再灌注 1—7周进 行神经功能损伤程度评分(Neurologicalseverityscores，NSS)。免疫组织化学方法观察移植后NSCs的存活及分布情况。结果 ： NSCs经GDNF基因转染后2d发绿色荧光，抗nestin免疫荧光检测呈阳性。GDNF／NSCs组与NSCs组NSS评分比较，在再灌注 2周和3周显著降低 (P0．05)。移植的NSCs分布于缺血侧皮质、纹状体，移植后3、5、7周 ，阳性细胞数分别较 1、2周显著增多 (P0．05)。GDNFN／SCs组与NSCs组比较，第2、3、5、7周纹状体、皮质阳性细胞数显著增多 (P0．05)。从病理学上观察， GDNFN／SCs组神经毡较NSCs移植组致密。结论：移植GDNF基因修饰的神经干细胞能改善脑缺血大鼠神经功能，对脑缺血所 致的损伤具有一定修复作用。 【关键词】局灶性脑缺血；神经干细胞；GDNF；移植 【中国图书分类法分类号】R743．33 文【献标识码】A 【收稿日期】2009—04—29 ExperimentalstudyofGDNFgenemodifiedneuralstem celltranSplantatiOnOn thetreatmentofratsubjectedtofocaIcerebralischemia DuJie．etO1 (Dean’sOffice，LuzhouMedic College) A【bstract]Objective：ToobservethedistributionofgraftedGDNF—modifiedneuralstemceilsintheratbrainwihtfocalischemiaandto exploretheneuroprotectiveeffect．Methods：Neuralstemcells(NSCs)ofneonatalratwerecuhuredinvitro．Themodelofmiddlecerebral arteryocclution (MCAO)andreperfusionwassetup．Normalsaline (NS)，NSCsandGDNF／NSCsweretransplantedintohtel~eral ventricleofMCAOmodelafterreperfusion3daysbystereotaxisinstrument，Neurologicalseverityscore(NSS)testswereundertakeninall rgoups1，2，3，5，7weeksrespectivelybeforeandaftertransplantation．Immunohistochcmistry wasused to check the survivalnad distributionofNSCsinvivo．Results：NSCstranfectedafter2dwith