微生物实验八：芽孢的染.pptVIP

芽孢的染色 一、目的要求 二、实验原理 芽孢示意图 三、实验材料 四、实验内容 芽孢染色 * * 1、学习细菌的特殊染色方法——芽孢染色。 2、观察细菌的染色特征 。 1、芽孢染色 芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）处理，则菌体和芽孢易于区分。  （一）菌种 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌 自接菌种（可疑细菌） （二）药物 生理盐水 5%孔雀绿染液 0.5%的蕃红水溶液 绘图墨汁（上海墨水厂 沪光绘图墨水） 甲基紫水溶液、纯甲醇 （三）其它物品 载玻片 盖玻片 无菌水 木夹子 将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌涂片、干燥、固定。滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。用木夹夹住载玻片在火焰上（微火）加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，及时添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约5分钟。倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。用番红水溶液复染2-5分钟，水洗。待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。 * * *