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- 2017-08-25 发布于重庆
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RNA的转录合成.ppt
原核生物RNA的转录 RNA Transcription in Prokaryotes 大肠杆菌RNA聚合酶 E.coli RNA Polymerase 大肠杆菌σ70 启动子 The E.coli σ70 promoter (2) II型启动子:RNA聚合酶II识别 II型启动子 Promoter Gfp基因在灰盖鬼伞菌丝中的表达 Promoters for RNA polymerase III rRNA 基因(rDNA) 人类rDNA编码产生一个45S的rRNA转录物 (13000nt),这一转录物随后被切成18S (2000nt), 5.8S (160nt) 和 28S (5000 nt)各1个的 rRNA. 人类细胞在不同的染色体上分布有5簇rDNA重复基因(串联基因簇),每簇有40个拷贝,拷贝之间被非转录的间隔序列分开(图) 这种RNA多基因拷贝的连续转录是产生足够且加工的rRNA。rRNA和蛋白质结合形成了核糖体 (1) I型启动子( RNA聚合酶I启动子) 45S rRNA processed into rDNA 每一个rRNA簇被称为一个核组织区域(nucleolar organizer regions). 在rRNA合成活跃阶段,前rRNA转录物与rDNA捆扎在一起可在显微镜下看到“圣诞树” (Christmas tree structures)样的结构.(图) 2. I 型启动子的特征 I型启动子由两部分的转录控制区域构成:核心元件(Core element,CE) 和上游控制元件(Upstream control element, UCE) 前 rDNA RNA Pol I promoters in human cells 上游结合因子(Upstream binding factor1, UBF1):一种特异DNA结合蛋白, 与UCE和核心元件上游的一段序列结合,UBF1可使转录速率大大增强. UBF1的两个结合位点序列之间没有明显的相似性, UBF1的分子先结合一个序列元件,随后通过蛋白-蛋白之间的互作结合,导致在两个位点间的DNA形成一个环状结构. 3. RNA聚合酶与转录因子 选择因子1(Selectivity factor1, SL1):聚合酶I 转录所必需. SL1结合并稳定UBF-DNA复合物,且与核心元件游离的下游部分相互作用. SL1本身没有与启动子特异结合的特性,它促使Pol I与UBF-DNA复合物的结合并起始转录. UBF1 UBF1 RNA Pol II (RNA聚合酶II) 1)RNA Pol II 存在于核质中 2)负责所有编码基因和一些snRNA基因的转录 3)合成的前mRNA需经过一系列的加工,如RNA 5’端生成帽子结构、RNA 3‘端加上poly A 尾巴以及内含子剪接 Typical RNA Pol II genes 特征: (1)TATA box:在上游约-25-35bp位置,有7对共有碱基序列5’-TATA(A/T)A(A/T)-3‘。决定RNA Pol II 的位置或正确的起始转录。 (2)帽子位点(Cap site):即转录的起始位点,大都为A碱基。 (3)CAAT box:即上游调控元件(UREs)。保守序列为GG(C/T)CAATCT,一般位 于-75bp附近。该序列确保启动子的有效转录。 A 其他真核生物的启动子: ( 1)缺乏TATA框,只含起始元件,如老鼠的末端脱氧核苷酸转移酶基因,其起始元件位于转录起始点附近,从-6至+11,序列为GCCCTCATTCTGGAGAC。 (2)没有TATA框,也不含起始元件,只有20-50bp的GC区。 这些启动子的转录效率很低。 食用菌gpd启动子: 1 ATTCAAGCAGTCAATGGATTGGAGTGTATTTAGAATCGAAGGTTGTGGAA51 CAAGGAAAAGATGCGGACGAAAAACACAACTGATCCTTTTATAGATAATC101 GCGCTTCAGTCAAATCTTGATTGCGTGATGTTGTGACTTCGACAATAGCC151 CTAAAGTCTAGACCTTAGAACACTTTAGTACCTCGGACCTGCGATTGGGT201 AGGATTTACTGGCCGAGTCCTTTGGGATGGACTGCCAATCAGCAAACGTT251 CTTCAGTTCTATCG
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