大肠杆菌的培养和分离学案.docVIP

选修1 生物技术实践 第一部分 微生物的利用——大肠杆菌的培养和分离学案 一、课标内容：进行微生物的分离和培养 二、教学要求： 基本要求 进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。 进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。 发展要求 说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。 说明 实验2和实验3不作要求。 三、知识要点： 1．微生物是指结构 、形体 的 细胞、 细胞或 细胞结构的 生物，如 。绝大多数微生物与传染病无关，对人类 ，有多种用途。 2．细菌是单细胞的 生物，从形态上分为 菌、 菌、 菌（弧菌）。细菌结构上，有 ，无 ，只有一环状 。有些细菌外有荚膜和鞭毛。有些细菌在不良的环境条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做 。当环境适宜时，休眠体又可以萌发，形成一个细菌。细菌繁殖方式: 繁殖，速度很快。单个细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做 。他是 的重要依据。细菌在基因工程中应用广泛，可为其提供 载体，也可作为 细胞。细菌用革兰氏染色法分为革兰氏 菌和 菌两大类，区别在 的成分不同。大肠杆菌是革兰氏 、 厌氧的肠道 菌。 3．培养基按物理状态分： 培养基、 培养基、 培养基。其中液体培养基常用于 ，半固体培养基可观察微生物的 ，固体培养基用于 。细菌扩大培养要用 培养基，细菌分离要用 培养基。细菌的分离方法有两种： 和 。是消除 的通用方法，也是用于 高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离法，方法 ；涂布分离法，单菌落 ，但操作 。不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方，细菌 ，霉菌 。通常细菌培养基要用 和 提取物来配制，还要加入一定的 ，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用 配制或 豆芽汁即可。尽管培养基的配方各不相同，但一般都含有 、 、 和 等营养物质。另外还需要满足微生物生长对 、 、 等的要求。如细菌要霉菌要 通常用于 ，如果各种器皿用此法灭菌，灭菌后放入 的烘箱中烘干，再放到 ，打开 和过滤风，灭菌 min。 比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 大部分致病的微生物 不能[来源:学|科|网] 强烈 全部微生物 能 5.大肠杆菌的培养和分离实验操作 培养基的配置与灭菌 倒平板 注意事项 （1）培养基灭菌后，需要冷却到 ℃左右时，才能用来倒平板 （2）灭菌及消毒：超净台用超净紫外灯和过滤风灭菌；桌面及人手用 消毒 （3）操作时右手无名指和小指夹住封口膜,另外三指持三角瓶,左手拿培养皿并打开上盖的一边,在 旁操作. （4）使锥形瓶通过 灼烧，再向培养皿倒入培养基。 （5）倒入培养基后，立即将培养皿置于 ，并轻轻晃动，使培养基铺满底部形成 。 （6）平板冷凝后，要将平板 . （7）在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板不能用来培养微生物 大肠杆菌的扩大培养 注意事项: （1）在超净台的酒精灯火焰旁从斜面上用接种环取菌; （2）取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌, 后方能取菌; （3）取菌后封口膜和棉塞复原. 大肠杆菌的划线分离