响应曲面法优化五倍子生料发酵产单宁酶的条件.docVIP

响应曲面法优化五倍子生料发酵产单宁酶的条件 摘要： 单因素实验表明五倍子含量、初始加水量、培养温度是显著影响黑曲霉 B0201 利用五倍子生料固体发酵产单宁酶的因子。在此基础上采用中心旋转组合设计，建立了五倍子生料发酵产单宁酶的二次多项数学模型，探讨了主要因素的影响效应及其交互作用，优化出最佳条件为：五倍子含量 17%、液固比为 1.5∶1、温度 32 ℃，并验证了模型的有效性，从而表明响应曲面优化的模型适合于五倍子生料发酵工艺。 关键词： 响应曲面；中心旋转组合设计；单宁酶；五倍子；生料发酵 Optimization of conditions of tannase production with Gallnut by unsterile fermentation using response surface methodology Abstract: The results of factorial experiment showed that the content of Gallnut, initial moisture and incubation temperature were the significant factors that severely affected Aspergillus Niger B0201 producing tannase with unsteriled Gallnut by solid-state fermentation. Based on the results, central composite rotatable design(CCRD) was employed. A second order quadratic equation for unsterile fermentation of Gallnut was built and effect of main factors and their corresponding relationships were studied in the present work． The optimal conditions were 17% Gallnut content, 1∶1.5 of the liquid-solid ratio, 32 ℃ in temperature. The applicability of the model equation for predicting the optimum response values was verified effectively by the validation data, thus indicating the suitability of response surface methodology (RSM) in optimizing the process of unsterile fermen- tation of Gallnut were well. Key words: response surface methodology(RSM); central composite rotatable design(CCRD); tannase; Gallnut; unsterile fermentation 单宁酶可水解没食子单宁中的酯键和缩酚羧 键，生成没食子酸和葡萄糖 [1]。单宁酶广泛地应用响应曲面法优化五倍子生料发酵产单宁酶的条件 于饮料、酿酒、医药、制革、化妆品等领域， 特 别是在制备药用中间体没食子酸和食品抗氧化剂 没食子酸丙酯 (PG)，以及在处理茶叶的“冷后 浑”和啤酒沉淀等方面，有重要应用价值。美国 食品 与药物管 理局(FDA)已确定 单宁酶 为 安 全产品，在日本单宁酶也通过批准应用于食品工 业 [2，3] 。但目前生产单宁酶的效率不高，市场价格 昂贵，阻碍了单宁酶的应用，因此单宁酶发酵生 产的研究具有重要的意义。 本课题组发现了一种实用性很强的生产单宁 酶的新方法，即黑曲霉 B-0201 利用五倍子生料固 体发酵生产单宁酶。此生料发酵工艺非常适合利 用五倍子为诱导物生产单宁酶，避免了高温对五 倍子的破环，简化了设备和生产流程，节约了成 本，且大幅度地提高了单宁酶的生产效率，单宁 酶活力是常规灭菌工艺的 3.6 倍。 本文在单因子实验研究的基础上，采用 De－ sign -Expert7.0 中 Central Composite Rotatable De－ sign(CCRD)即中心旋转组合设计原理 [4] ，对影响黑 曲霉利用五倍子生料固体发酵产单宁酶的显著因 子—五倍子的含量、初始加水量和培养温度进行 了进一步的探索，建立了五倍子