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病毒的分离与鉴定.ppt
病毒的分离与鉴定（一） 1、病毒的培养与鉴定 2、病毒的CPE过程 3、病毒的电镜照片观察 4、流感病毒的分离鉴定（一） （1）鸡胚尿囊腔接种法 （2）病毒的动物接种法－小白鼠脑内 接种 流感病毒的分离鉴定 （1）鸡胚尿囊腔接种法 （2）病毒的动物接种法－小白鼠脑内接种 目的：熟悉人工培养病毒的常用方法及其操作技术。 实验材料： (1)来亨鸡受精卵、卵架、检卵灯。 (2)碘酒、酒精消毒棉球。 (3)灭菌的手术刀、镊子、剪刀。 (4)1ml注射器及针头。 (5)病毒液:流感病毒、新城鸡瘟病毒。 (6)无菌胶布。 分离鉴定程序 病人急性期咽喉含漱液 (经双抗处理) 鸡胚培养(羊水囊或尿囊腔) 35℃ ，72h 收获：取羊水或尿囊液作血凝试验 (+) (—) 作血凝抑制试验 盲传鸡胚两代，仍为 阴性时报告阴性 实验材料 (1)脑炎病毒悬液. (2)小白鼠(3W龄). (3)1ml的注射器、针头. (4)碘酒、酒精棉球. 实验方法: (1)以左手将小白鼠头部和体部固定于台面. (2)用碘酒、酒精棉球消毒头部右侧眼、耳间部位 (3)以1ml的注射器抽提病毒悬液,以右手持注射器,将针头向眼外与耳根连线中点略偏向耳的方向刺入颅腔,约进针2~3mm,注入量0.02~0.03ml. (4)注射完毕,将用过之物煮沸消毒. 实验结果: 接种后每日观察动物2次.动物一般在接种后3-4d后开始发病,食欲减退,活动迟缓,耸毛、震颤、卷曲、尾强直,逐渐导致麻痹、瘫痪而死亡. * * 实 验 九 鸡胚尿囊腔接种法 (1)取孵育10~12d鸡胚,在检卵灯下画出气室界线,于胚胎附近无大血管处画出标记作为注射入口. (2)将卵置于卵架上,消毒标记处,用无菌剪刀尖在标记处打一小孔. 实验方法： (3)用灭菌注射器吸取流感病毒液 0.2ml,由小孔刺入0.5cm后,进行注射. (4)注射后,用无菌胶布 封孔,置35度温箱孵育. (5)每日在灯下检视鸡 胚情况(若鸡胚在接种 后24h内死亡为非特异 性死亡,应弃之). 实验方法： 病毒的动物接种法－小白鼠脑内接种 病毒的动物接种法－小白鼠脑内接种
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