赤芝子实体的化学成分研究.docVIP

赤芝子实体的化学成分研究 　　摘要：目的研究赤芝子实体的化学成分。方法应用多种色谱方法进行分离和纯化，通过1H，13C-NMR和MS等波谱技术确定化合物的结构。 　　关键词：赤芝 子实体 三萜类 二十六烷酸 　　赤芝Ganodermalucidum（Leyss.exFr.）Karst.为担子菌纲多孔菌科灵芝属植物[1]，与紫芝GanodermasinenseZhao，XuetZhang均首次收录于《中国药典》2000年版[2]，作为灵芝的药用正品。灵芝在我国已有悠久的应用历史，东汉时期的《神农本草经》已把灵芝列为上品，认为灵芝能防治多种疾病，是滋补强壮、扶正固本的珍品。 　　1仪器与材料 　　熔点用X-5型显微熔点测定仪测定（未校正）；NMR谱用BRUKERAvance300及BRUKERAvance500型核磁共振仪测定；ESI-MS用HP1100HPLC/ESI液质联用仪测定；EI-MS用岛津MS7070E型质谱仪测定。 　　薄层色谱硅胶及柱色谱硅胶为青岛海洋化工厂生产；SephadexLH-20为Pharmacia公司产品；硅胶GF254薄层预制板为烟台化学工业研究所产品；所用试剂均为分析纯。 　　2方法与结果 　　2.1提取与分离 　　赤芝子实体粗粉（干品）4kg，用8倍量乙醇分别回流提取3次，2h/次，提取液浓缩得浸膏，加适量水混悬稀释后，得到下层沉淀（Ⅰ）部分（33g）和上层混悬液，上层混悬液依次用石油醚（60～90℃）、二氯甲烷、醋酸乙酯分别萃取，合并萃取液，回收溶剂，得到二氯甲烷（Ⅱ）萃取部分（63g）。Ⅰ部分经硅胶柱层析，石油醚-醋酸乙酯（10∶0～0∶10））梯度洗脱，每份500ml，分别浓缩，其中94～98份合并后经反复硅胶柱层析（石油醚-醋酸乙酯）和SephadexLH-20纯化（甲醇），得到化合物5（23mg），Ⅱ部分采用硅胶柱层析，石油醚-醋酸乙酯（10∶0～0∶10））梯度洗脱，其中37～42部分、43～45部分、69～81部分、82～100部分、152～156部分及223～239部分分别经反复硅胶柱层析（石油醚-醋酸乙酯系统）及SephadexLH-20纯化（氯仿-甲醇系统），得到化合物1（8.4mg）、2（120mg）、3（6.7mg）、4（13mg）、6（13mg）、7（36mg）和8（15mg）。 　　2.2结构鉴定 　　2.2.1化合物1白色晶体，mp171～173℃，分子式C30H48O2。EI-MSm/z：440[M]+，相对分子质量440。Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR（CDCl3，300MHz）δ：5.47（1H，d，J=6.4Hz，C7-H），5.40（1H，t，J=6.6Hz，C24-H），5.31（1H，d，J=6.2Hz，C11-H），4.00（2H，s，C26-H），3.24（1H，dd，J=11.4，4.4Hz，C3-H），1.67（3H，s，C27-CH3），1.01（3H，s，C28-CH3），0.88（6H，s，C19和C30-CH3），0.57（3H，s，C18-CH3）。13C-NMR（CDCl3，75MHz）δ：35.72（C-1），28.10（C-2），78.97（C-3），38.68（C-4），50.31（C-5），22.98（C-6），120.25（C-7），142.72（C-8），146.00（C-9），37.36（C-10），116.30（C-11），37.83（C-12），43.77（C-13），49.14（C-14），27.88（C-15），31.49（C-16），50.92（C-17），15.73（C-18），22.70（C-19），36.05（C-20），18.37（C-21），35.91（C-22），24.51（C-23），127.03（C-24），134.39（C-25），69.08（C-26），13.58（C-27），25.53（C-28），27.88（C-29），15.73（C-30）。将化合物1的光谱数据与文献[3，4]对照，确定为灵芝醇B。 　　2.2.2化合物2白色结晶，mp112～113℃，分子式：C30H44O7。EI-MSm/z：516[M]+，相对分子质量516。Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR（CDCl3，500MHz）δ：4.79（1H，m，C15-H），4.62（1H，m，C7-H），1.28（3H，s，C19-CH3），1.26（3H，s，C28-CH3），1.12（3H，s，C27-CH3），1.10（3H，s，C29-CH3），0.98（3H，s，C18-CH3），0.90（3H，s，C21-CH3）。13C-NMR（CDC