初步研究非结核分枝杆菌性淋巴结炎病理学改变.docVIP

初步研究非结核分枝杆菌性淋巴结炎病理学改变 　　【摘要】目的探讨非结核分枝杆菌性淋巴结炎的特征性组织病理学改变。方法建立非结核分枝杆菌性淋巴结炎的实验动物模型，光镜下观察组织病理学改变；对1例临床初步诊断为非结核分枝杆菌性淋巴结结核患者的病理组织标本经多重PCR方法检测筛选后，光镜下观察组织病理学改变。结果非结核分枝杆菌感染所致的淋巴结炎的病理学改变与我们所熟知的淋巴结结核的病理学改变不完全相同。在动物模型中观察到的非结核分枝杆菌淋巴结炎的特征性病理学改变如下： 　　淋巴结内可见结节状肉芽肿形成，中央呈凝固性坏死，其中可见较多的中性粒细胞及其核碎屑。 　　坏死区周围可见类上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞，并可见纤维组织包裹。肉芽肿内外均可见朗汉斯巨细胞；(2)淋巴结内可见匐形性坏死，坏死旱长条状，中央部分为凝固性坏死，其中有大蕈中性粒细胞及其核碎屑，周围可见类上皮细胞、淋巴细胞及单核细胞，并可见纤维组织包绕；(3)淋巴结内可见星状和星芒状坏死。对初步诊断为非结核分枝杆菌性淋巴结炎的1例石蜡包埋组织标本，光镜下观察淋巴结内可见上皮样肉芽肿，匐行性坏死和星状坏死，坏死中可见大量中性粒细胞及其核碎屑，周围可见类上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞、朗汉斯巨细胞；类上皮细胞的细胞核旱极性排列，周围并可见纤维组织或胶原组织包绕。结论匐形性坏死、星状和星芒状坏夕匕、中央千酪样坏死中可见大量的中性粒细胞和粒细胞细胞核的碎屑、在中央坏死区的周围可见类上皮细胞胞核的极性排列，是非结核分枝杆菌性淋巴结炎的部分特征性组织病理学改变。 　　【关键词】分枝杆菌，非典型性；淋巴结炎；病理学 　　非结核分枝杆菌(nontuberculousmycobacteria，是广泛存在于土壤、水和尘埃中的环境微生物，多为机会致病菌。NTM感染的最常见表现是单侧、慢性颈部和颜面部淋巴结炎，伴特征性的紫罗兰色的皮肤改变。感染的来源推测是食人了被污染的土壤或水。NTM淋巴结炎多由鸟．胞内分枝杆菌复合群和瘰疬分枝杆菌所引起，其临床症状与淋巴结结核十分相似，但NTM对多数传统抗结核药物呈原发性耐药，因此，二者的鉴别非常重要。 　　在光学显微镜下，结核分枝杆菌，MTB)复合群与NTM仅有细微的区别： 　　比MTB长且粗。目前，分子遗传学研究为临床医生提供了快速准确地鉴别分枝杆菌属种的方法埔。，但是确诊尚需依据培养及生化试验的结果。 　　为详细了解NTM淋巴结炎的病理改变，我们建立了实验动物模型，同时对NTM淋巴结炎患者的石蜡包埋组织标本进行组织病理学分析，现报道如下。 　　材料与方法 　　一、材料 　　1．实验动物：豚鼠36只，雌雄各半，体重150-200g；新西兰兔20只，雌雄各半，体重500-520g。 　　均购自我院比较医学科，正常饮水和喂食。 　　2．实验用标准菌株：瘰疬分枝杆菌ATCC93307、胞内分枝杆菌ATCC93314，均为冻干菌种，由中国药品生物制品检定所提供。 　　3．临床标本：石蜡包埋组织标本共211例，其中颈部淋巴结标本134例，其他部位淋巴结标本例，由南京市钟山医院病理科和南京军区南京总医院病理科提供。标本均取自临床初步诊断为淋巴结结核的门诊及住院患者，其中男135例，女76例。 　　年龄3个月～6岁52例，7-13岁50例，14～44岁例，45-49岁13例，60岁以上9例。组织标本均在手术取出后即行4％甲醛固定，石蜡包埋，染色。 　　二、方法 　　1．实验动物分组：36只豚鼠按随机数字表法分为2组：胞内分枝杆菌感染组和瘰疬分枝杆菌感染组各16只，健康对照组4只；20只新西兰兔按随机数字表法分为2组：胞内分枝杆菌感染组和瘰疬分枝杆菌感染组各8只，健康对照组4只。豚鼠在分枝杆菌菌液接种前3d做PPD皮肤试验，皮试结果均为阴性。 　　2．实验用标准菌株菌液的制备：瘰疬分枝杆菌国际标准株及胞内分枝杆菌国际标准株分别接种在改良罗氏培养基上，3～4周后待有菌落生长时，用白金耳针挑取新鲜菌落，重量约1mg，放人生理盐水1ml中在无菌研磨管中研磨。菌液研磨均匀后进行细菌浊度测定，分别调整细菌浊度MeFarland为标准1．0和3．0。 　　3．胞内分枝杆菌感染组的菌液接种：氯胺酮腹腔内注射麻醉后，在16只豚鼠的单侧腹股沟处皮下分别注射1．0McFarland／ml胞内分枝杆菌菌液0．2，在另外16只豚鼠的单侧腹股沟处皮下分别注射3．0McFarland／ml胞内分枝杆菌菌液0．2ml，其余4只为健康对照组，不接种分枝杆菌菌液。 　　新西兰兔的处理与豚鼠相同。氯胺酮腹腔内注射麻醉后，在8只新西兰兔的单侧腹股沟处皮下分别注射1．0McFarland／ml胞内分枝杆菌菌液O．5ml，在另外的8只新西兰兔的单侧腹股沟处皮下分别注射3．0McFarland／ml胞内分枝杆菌菌液O．5